求细菌平板拮抗实验目的和实验原理,实验器材,实验步骤....
实验目的:分析细菌拮抗能力的强弱。
实验原理:拮抗细菌产生的拮抗物之能在琼脂中扩散,抑制指示菌的生长形成无细菌生长的透明圈。
实验器材:有待试拮抗菌菌落的平板、指示菌、营养琼脂平板、接种棒、移液器、无菌枪头、打孔器、镊子、酒精灯、酒精棉球、培养箱、刻度尺
实验步骤:在酒精灯前操作,用移液器取0.1ml指示菌悬液,加在在营养琼脂平板上,接种棒消毒冷却后,用接种棒涂布均匀;打孔器消毒冷却后,对待试拮抗菌菌落打孔;用镊子取有菌落琼脂块,倒扣在涂布了指示菌的平板上;盖上平板,在培养箱中培养;待指示菌长出后,观察指示菌平板上拮抗军琼脂块周围形成的透明抑菌圈,测量抑菌圈的直径。
水中细菌总数的测量不用再这么详细了吧,去一定体积的水样,夹在营养琼脂平板上,用涂布棒涂布均匀,在培养箱中倒置培养,到时候数菌落数就行了,如果水中细菌数可能太多,就进行梯度稀释后接种涂布。
农药室内生测
抑菌圈实验说明 抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式,主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。 用具和材料 霉菌培养皿,无菌吸管(或针筒),圆片滤纸(直径2cm),带玻璃珠的无菌水,带过滤漏斗的三角牌,镊子,接种针(环),熔化状态的琼脂培养基(最好保温于45℃左右水浴中),一定浓度的药剂,供试验用的菌种。 试验过程 1. 用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中,用手振荡数分钟使孢子分散,过滤后制成混合孢子悬液。 2. 用无菌吸管(或针筒)向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。 3. 向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均 匀,待其冷却。 4. 用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻,取出置于带菌培养基平板的中央, 盖上盖子 5. 置适宜温度下,培养2~3d,观察滤纸片圆片周围抑菌圈的有无及大小。 注意事项 1. 所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理,操作必须在无菌室(或无菌箱)内于火焰旁进行。 2. 霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液,即这里指的混合菌液是霉 菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液,并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。 3. 混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL. 4. 倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高(一般为45℃左右),否则会引起微生物死亡。 也不能太低,因为琼脂会很快凝结,以致搅拌不均匀,影响试验结果。 5. 各种微生物的最适生长温度不同(例如霉菌一般为25~30℃,细菌一般为32~37℃等), 恒温培养时宜分开放置。 结果评判 由于滤纸圆片所吸附的药液慢慢向四周扩散,因此在滤纸片的周围就出现清晰的抑菌圈(加入该防霉剂对供试菌有抑制效果)。抑菌圈的大小代表药剂抗菌力的高低。在一定的药剂浓度范围内,药剂的浓度越高则抑菌圈的直径越大。此法同样适合于测定单个菌的抗菌效果。