DNA浓度鉴定纯度鉴定方法有哪些?

admin 泰里仪器网 2024-10-11 15:06 0 阅读

一、DNA浓度鉴定纯度鉴定方法有哪些?

4 个核苷酸的 260/280 读数分别是:

Guanine: 1.15

Adenine: 4.50

Cytosine: 1.51

Thymine: 1.47

T 和 A 約佔 DNA 40%, C 和 G 約佔 DNA 60%,所以按比例算的话 1.8 左右就是纯度好的DNA。

二、简述如何鉴定DNA样品的纯度?

好点的实验室都会有类似于Nano Drop这种仪器吧,滴一滴,等几秒,OK

三、浓度/纯度是?

浓度是指加了物质的液体,纯度是指液体什么都没有本身的纯度。

四、dna纯度怎么算?

DNA在260nm处吸收强烈,OD260值为1的溶液相当于大约50μg/mL双链DNA,而蛋白质的特征吸收在280nm处,测定DNA提取物中260nm处和280nm处的吸收值OD260和OD280,可大致判断所提取的DNA的纯度。OD260/OD280的值在1.7~1.9之间,说明提纯度较好,低于1.7,说明提取的DNA中残留有较多的蛋白质,可用酚、氯仿继续抽提;若大于2.0,说明有RNA污染或DNA链断裂。提取的DNA量可用下式计算:

P=cV

式中,c为DNA浓度,单位为μg/mL;V为提取的DNA溶液的体积,单位为mL。

如提取的DNA样品为2mL,进行OD260值测定的检测样品为0.1mL+0.9mL TE缓冲液=1mL,DNA的稀释倍数=1mL/0.1mL=10倍,OD260和OD280值分别为0.63和0.35,则:

纯度= OD260/OD280=1.8。

样品中DNA浓度c=50μg/mL * OD260 * 稀释倍数=50μg/mL * 0.63 * 10 =315μg/mL

提取得到的DNA样品量是:P=315μg/mL * 2mL =0.630mg。

五、dna纯度怎么填?

DNA/RNA纯品的OD260/OD280为1.8或2.0,故根据OD260/OD280的值可以估计DNA的纯度。若比值较高说明含有RNA,比值较低说明有残余蛋白质存在。OD230/OD260的比值应在0.4-0.5之间,若比值较高说明有残余的盐存在.本实验室机器显示是OD260\OD230,则比值应在2-2.5之间,偏小则说明有残余盐剩余。

六、DNA浓度的计算?

另外,我还知道一点就是,DNA纯度的判别方法测定260和280 nm下的吸光值,然后比值。

A260/A280,如果在1.8+—0.2范围内,这就说明提取的DNA还比较纯净。

最好是1.8这个在合成引物的回执单中会写的很清楚

七、dna浓度稀释公式?

50μg/mL是双链DNA的,40μg/mL是RNA,37μg/mL是单链DNA以及30μg/mL的寡核苷酸,因此若是测定RNA的含量,50应该换为40.

光程是1厘米的比色杯,A=1时,双链DNA的含量是50μg/mL.

在这里,我们可以把公式中的50看作一个常数.不用理会就说是常数.

公式

DNA含量(ug)=50X(260nm的读数)X 稀释倍数。

八、怎样通过凝胶电泳图谱检测DNA的纯度和浓度?

这个应该用分光光度计检测啊,浓度看OD260,纯度看OD260/OD280以及OD260/OD230。要是非用电泳检测,纯度就看看点样孔是否发亮,发亮的话是有蛋白质,浓度的话可以在旁边加一个已知浓度的marker。

九、纯度与浓度的区别?

1、定义不同

纯度:纯度通常是指色彩的鲜艳度。从科学的角度看,一种颜色的鲜艳度取决于这一色相发射光的单一程度。人眼能辨别的有单色光特征的色,都具有一定的鲜艳度。不同的色相不仅明度不同,纯度也不相同。此外化学试剂也有纯度的划分。

浓度:是分析化学中的一个名词。含义是以1升溶液中所含溶质的摩尔数表示的浓度。以单位体积里所含溶质的物质的量(摩尔数)来表示溶液组成的物理量,叫作该溶质的摩尔浓度,又称该溶质的物质的量浓度。

单位溶液中所含溶质的量叫做该溶液的浓度溶质含量越多,浓度越大。浓度可以用一定的溶液中溶质的克数、克分子数或克当量数计算。一般用单位溶液所含溶质的重量的百分比来表示。

程度,朱光潜《文艺心理学》第五章一:“我们对于一种艺术品或是一幅自然风景,欣赏的浓度愈大,就愈不觉得自己在欣赏它。”

2、分类不同

纯度:试剂规格基本上按纯度(杂质含量的多少)划分,共有高纯、光谱纯、基准、分光纯、优级纯、分析和化学纯等7种。国家和主管部门颁布质量指标的主要优级纯、分级纯和化学纯3种。

浓度:常用的浓度表示法有:质量百分浓度(质量分数,m/m):最常用。指每100克的溶液中,溶质的质量(以克计)。

质量百分浓度=(溶质质量(g))/溶液质量(g))×100%=溶质质量(g))/(溶质质量(g)+溶剂质量(g))×100%

体积百分浓度(体积分数,V/V):常用于酒类。指每100毫升的溶液中,溶质的体积(以毫升计)。

体积百分浓度=(溶质体积(mL)/溶液体积(mL))×100%=溶质体积(mL)/(溶质体积(mL)+溶剂体积(mL))×100%

百万分浓度(ppm):指每一千克溶液所含的溶质质量(以毫克计)。

百万分浓度=溶质的质量(mg)/溶液的质量(kg)

质量摩尔浓度:指每一千克溶剂所含的溶质的量(以摩尔计)。

质量摩尔浓度=溶质物质的量(mol)/溶剂质量(kg) 1m = 1 mol/kg

摩尔分率:溶质物质的量(mol)/溶液的量(mol)

体积摩尔浓度(摩尔浓度):每一升的溶液中,溶质的量(以摩尔计)。

体积摩尔浓度=溶质的量(mol)/溶液体积(L) 1M = 1mol/L公式:c(溶液物质的量的浓度mol/L)=n(溶质的物质的量)/v(溶液ml)

3、用处不同

纯度:色彩用例,纯度是说明色质的名称,也称饱和度或彩度、鲜度。色彩的纯度强弱,是指色相感觉明确或含糊、鲜艳或混浊的程度。高纯度色相加白或黑,可以提高或减弱其明度,但都会降低它们的纯度。

如加入中性灰色,也会降低色相纯度。在绘画中,大都是用两个或两个以上不同色相的颜料调合的复色。根据色环的色彩排列,相邻色相混合,纯度基本不变(如红黄相混合所得的橙色)。

对比色相混合,最易降低纯度,以至成为灰暗色彩。色彩的纯度变化,可以产生丰富的强弱不同的色相,而且使色彩产生韵味与美感。

工业用例,纯度是石英套管的重要指标,对理化性能和使用性能影响甚大,如失透性、高温强度、软化点、光的传导、热稳定性、化学稳定性、耐辐射性、荧光特性等;

此外,用于半导体工业的石英套管,对纯度的要求更为苛刻,微量的杂质将给半导体材料的电性能和寿命以及集成度带来严重的影响。

由于半导体材料的纯度要求控制在ppb数量级以下,因此石英套管则应控制在PPm数量级以适应半导体工业的需要。B的分凝系数近于1,最难除掉,是最有害的杂质之一,Cu、Fe、Ti等影响半导体的少子寿命,K、Na、Li是单晶材料产生微缺陷的有害杂质。

浓度:血药浓度,血药浓度是指药物在人体血液中的稳态浓度。稳态浓度是指病人每日血中药物浓度始终比较恒定地稳定在有效范围。每种药物均需服用一定时间才能达到稳态浓度。抗痫药达稳态浓度约需要5个半衰期。

溶液浓度,溶液浓度可分为质量浓度(如质量百分浓度)、体积浓度(如摩尔浓度、当量浓度)和质量-体积浓度三类。

十、dna纯度浓度测定时,为什么测230nm处的od?

除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度,如 A 260 / A 280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是 280 nm。

纯净的样品,比值大于 1.8(DNA)或者2.0(RNA)。

如果比值低于 1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

A 230表示样品中存在一些污染物,如碳水化合物,多肽,苯酚等,较纯净的核酸 A 260 / A 230 的比值大于 2.0。

A 320检测溶液的混浊度和其他干扰因子。

纯样品,A 320 一般是 0。

The End
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