一、qpcr仪器用处？
荧光定量PCR法（qPCR）：是在常规PCR基础上，将『针对支原体特异性保守序列的探针』做荧光标记，使PCR扩增后的产物带有荧光，利用荧光信号的变化和配套软件，进行DNA扩增反应的实时监测，简称qPCR
二、qpcr仪器有哪些品牌？
市场上有的进⼝品牌的qPCR仪主要是这样⼏种哈：ABI、伯乐（Bio-Rad）、罗⽒（ROCHE）、安捷伦和Takara。国产的常见的是：杭州博⽇、上海宏⽯、杭州安杰思、西安天隆等等品牌。
我就选⼏个我⽤过的qPCR仪来分析⼀下，分别是：ABI-7500、Bio-Rad CFX96、ROCHE LightCycler® 480、上海宏⽯ SLAN48-P、杭州安杰思ADF9600。
三、qpcr 退火温度？
1、退火温度低于引物Tm值5 ℃左右，一般在45～55℃。退火温度需要从多方面去决定，一般根据引物的Tm值（Tm值=4(G+C) +2(A+T)）为参考，根据扩增的长度适当下调作为退火温度。然后在此次实验基础上做出预估。退火温度对PCR的特异性有较大影响。
2、延伸时间：1min/kb(10kb内）。引物延伸一般在72℃进行（Taq酶最适温度）。但在扩增长度较短且退火温度较高时，本步骤可省略延伸时间随扩增片段长短而定，一般推荐在1000bp以上，含Pfu及其衍生物的衍生设定为1min/kbp。扩展资料PCR的过程：1、DNA变性：（90℃-96℃）：双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA2、退火：（60℃-65℃）：系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。
3、延伸：（70℃-75℃）：在Taq酶（在72℃左右，活性最佳）的作用下，以dNTP为原料，从引物的3′端开始以从5′→3′端的方向延伸，合成与模板互补的DNA链。
四、qpcr退火温度怎么确定？
熔解温度（Tm）是引物的一个重要参数。这是当50％的引物和互补序列表现为双链DNA分子时的温度.Tm对于设定PCR退火温度是必需的。在理想状态下，退火温度足够低，以保证引物同目的序列有效退火， 同时还要足够高，以减少非特异性结合。合理的退火温度从55℃到70℃。退火温度一般设定比引物的 Tm低5℃。 设定Tm有几种公式。有的是来源于高盐溶液中的杂交，适用于小于18碱基的引物。 有的是根据GC含量估算Tm。确定引物Tm最可信的方法是近邻分析法。这种方法从序列一级结构和相邻碱基的特性预测引物的杂交稳定性。大部分计算机程序使用近邻分析法。 根据所使用的公式及引物序列的不同，Tm会差异很大。因为大部分公式提供一个估算的Tm值，所有退火温度只是一个起始点。可以通过分析几个逐步提高退火温度的反应以提高特异性。开始低于估算的Tm5℃，以2℃为增量，逐步提高退火温度。较高的退火温度会减少引物二聚体和非特异性产物的形成。 为获得最佳结果，两个引物应具有近似的Tm值。引物对的Tm差异如果超过5℃，就会引物在循环中使用较低的退火温度而表现出明显的错误起始。如果两个引物Tm不同，将退火温度设定为比最低的Tm低5℃ 或者为了提高特异性，可以在根据较高Tm设计的退火温度先进行5个循环，然后在根据较低Tm设计的退火温度进行剩余的循环。这使得在较为严紧的条件下可以获得目的模板的部分拷贝。
五、伯乐仪器qpcr仪连接不上电脑？
几种可能：
1.检测仪的检测插头与车辆检测座接触不良，清除干净插头和检测座再试；
2.仪器软件内部故障，对仪器进行升级后再测，仍无法检测可与厂家联系处理；
3.检测仪、数据线、检测插头、车辆检测座未正确连接，重新检查连接
六、qpcr仪器反应体系选择有什么影响？
qPCR的体系配制其实与常规的PCR体系是类似的，也包含了buffer、dNTP、DNA聚合酶、引物及模板，不同的地方在于qPCR体系还多了荧光标记（如SYBR Green I或probe）。所有的组分都要提供浓度信息，这对重复qPCR实验至关重要。Buffer中除了缓冲成分，最重要的就是Mg2+，是DNA聚合酶活性的必要条件。
DNA聚合酶除了浓度信息之外还要提供使用的聚合酶名称，如常规的Taq酶或者经过基因改造后具有更多其他特性的聚合酶，使用不同的酶做出的实验结果也不尽相同。引物的使用终浓度一般在100-600nM，探针的使用终浓度一般在200-400 nM。浓度太高易出现非特异扩增，太低则导致过低的扩增效率；因此最佳浓度要根据自己的实验来定，推荐前期预实验可以做一下浓度梯度的探索。
目前，大部分的qPCR实验都会选择使用各种kit，一般会提供2 x qPCR mix，里面预混了DNA聚合酶、SYBR Green I（染料法）、buffer、Mg2+和dNTP等，用户只需要加引物和模板即可。Kit说明书中一般不会提供各个组分的浓度信息，这种情况下，要备注kit的名称及生产厂家，同时，如果不是参照说明书中的配制方法，则要对改动的地方加以说明。
qPCR反应体系中有可能会用到各种添加剂，如DMSO、甜菜碱和BSA等，无非是要提高扩增效率或者反应特异性，如果用到添加剂也要备注工作浓度。值得注意的是有些添加剂对聚合酶是有毒性的，要在其正面和负面作用之间取得平衡，浓度梯度实验是有效的方法之一。
qPCR的反应体系一般在20-50 μl，常规采用20μl。尽量不要使用10 μl体系，加样不易控制且容易挥发，造成variation变大。
耗材及仪器
qPCR板材往往是实验者容易忽略的点。当采用96孔板时，要注意qPCR仪器的兼容类型：全裙边、半裙边及无裙边等。更推荐使用白色管而非透明管，这是因为白色对荧光的反射更彻底，反映在结果上是Cq值更小，从而一定程度上提高了检测的灵敏度，但要注意这对扩增效率是没有影响的[1]。唯一的弊端就是，看不到加样位置，也无法辨别是否有气泡，所以使用白色管时检测前要高速离心。
封膜也是要注意的细节，尽量采用热封，而不要使用粘性膜。手工封膜有可能密封不严，导致技术学重复之间的variation比较大。
qPCR仪器种类繁多，国产的，进口的，深孔的，常规的，等等。要备注使用的仪器型号及生产厂家，这是因为不同的设备做出来的结果很有可能是不同的。特别要注意的是，不同设备做出来的Cq值是没有可比性的，不能通过单纯比较Cq的大小来评判设备的灵敏度等性能指标，而要综合标准曲线等其他因素来衡量。
七、qpcr melt curve怎么设置温度？
一般染料法定量pcr在进行完pcr后都要运行熔解曲线,一般设定先94度几分钟,然后骤冷到65度（假定65度为退伙温度）.在65度时,pcr产物是以双链的形式存在的。 因为染料是插到双链dna的小沟里然后发荧光的,所以这个时候检测到很强的光信号,随着温度升高,双链逐渐打开,荧光信号逐渐减弱。
八、战区2gpu温度上不去
今天我们来讨论一下与战区2游戏相关的一个技术问题，那就是GPU温度上不去的情况。对于很多玩家来说，玩游戏时GPU温度的稳定性和提升潜力至关重要，特别是对于那些追求游戏性能极限的玩家来说。然而，在玩战区2游戏时，有些玩家会遇到一个问题，就是GPU温度无法达到理想的水平，这给他们的游戏体验带来了一定的困扰。
问题分析
要解决GPU温度上不去的问题，首先我们需要分析问题的原因。在玩战区2游戏时，GPU温度无法上升通常有以下几个可能的原因：
- 散热系统不足：可能是因为散热系统设计不良或者灰尘堵塞导致散热效果不佳。
- 驱动问题：显卡驱动程序可能没有正确安装或者需要更新。
- 电源问题：电源供应不足或者不稳定也会影响显卡的性能表现。
- 软件设置：游戏设置或者显卡驱动程序中的某些参数设置不正确也可能导致GPU温度无法上升。
解决方案
针对GPU温度上不去的问题，我们可以采取以下解决方案来改善情况：
1. 清洁散热系统：定期清洁电脑内部的灰尘，确保散热系统的通风良好。
2. 更新驱动程序：及时更新显卡驱动程序，保持最新版本，以确保显卡性能正常。
3. 检查电源供应：确保电脑的电源供应稳定，并满足显卡的功耗需求。
4. 调整游戏设置：根据自己电脑的配置和性能，合理调整游戏设置，避免过高或过低的设置影响显卡性能表现。
通过以上措施，相信大家在玩战区2游戏时，可以有效解决GPU温度上不去的问题，提升游戏体验和性能表现。
技术总结
在解决GPU温度上不去的问题过程中，我们不仅仅是在解决一个具体的技术问题，更是在锻炼我们的技术能力和解决问题的能力。通过不断调整、优化，我们可以更好地理解硬件与软件之间的关系，更好地发挥设备的性能潜力。
希望大家在玩战区2游戏时，能够享受到流畅的游戏体验，也能够通过解决一些技术问题，不断提升自己的技术水平。感谢大家的阅读！
九、qpcr 溶解曲线一般在多少温度？
一般染料法定量pcr在进行完pcr后都要运行熔解曲线,一般设定先94度几分钟,然后骤冷到65度(假定65度为退伙温度).在65度时,pcr产物是以双链的形式存在的。
2.
因为染料是插到双链dna的小沟里然后发荧光的,所以这个时候检测到很强的光信号,随着温度升高,双链逐渐打开,荧光信号逐渐减弱
十、鱼缸温度上不去？
如果鱼缸温度上不去，可能是加热棒质量不好。
因为加热棒理论上应该低于设定温度即开始加温，但实际上大多数加热棒都达不到那么灵敏，低2度左右重新启动属正常现象，如果一直温度上不来，则其质量太差，这个时候就要考虑换个新的加热棒了。