一、实时荧光定量PCR的原理？
荧光定量 PCR 最早称 TaqMan PCR ，后来也叫 Real-Time PCR ，是美国 PE （ Perkin Elmer ）公司 1995 年研制出来的一种新的核酸定量技术。
该技术是在常规 PCR 基础上加入荧光标记探针或相应的荧光染料来实现其定量功能的。
其原理：随着 PCR 反应的进行， PCR 反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。
每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。
二、荧光定量pcr怎么设置退火温度？
最好也最快的方法是做个梯度PCR，马上能选出最优退火温度
三、什么是实时荧光定量PCR技术？
关于这个问题，实时荧光定量PCR技术是一种基于PCR（聚合酶链式反应）原理，通过检测荧光信号实时监测PCR反应过程中产生的DNA复制量的技术。
相比于传统的PCR技术，实时荧光定量PCR技术具有更高的灵敏度、更高的特异性和更快的反应速度。
该技术可以用于检测DNA序列、mRNA表达量、病原体等，被广泛应用于生物医学、生态学、环境科学等领域。
四、ptpcr和实时荧光定量pcr区别？
rt pcr是real time pcr的简称，翻译成中文就叫实时荧光定量pcr，所以这两者没有区别，只是叫法不同而已。
五、为什么实时荧光定量PCR要用质控？
做质控有几个目的
1）扩增模板是否合格，是否含有较多抑制PCR反应的物质，是否含有gDNA
2）扩增效率是否合作，qPCR扩增效率在90%～110%之间结果才可信。
六、实时荧光定量PCR技术原理是什么？
实时荧光定量PCR技术是一种利用特定的荧光探针在特定温度、pH和特定条件下检测和定量PCR产物的技术。
这种技术利用特定的荧光探针，可以实时监测PCR反应物的合成过程，并定量分析PCR产物的含量。
七、如何稀释实时荧光定量PCR的引物？
用已知浓度的DNA样本（通常是质粒）梯度稀释成一系列的样本。做实验的时候，这些标准品和待测样本加在同样一块96孔盘的不同孔内。一起做PCR。标准品的荧光强度和已知的浓度作图，可以得到一条标准曲线。而待测样本的荧光强度测出以后，就可以在标准曲线上算出样本浓度了。
八、实时荧光定量pcr中的绝对定量怎么做？
在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。随着PCR反应的进行，PCR反应产物不断累计，荧光信号强度也等比例增加。我们实验室用BIOG-PCR技术测得的扩增曲线起跳值一般在30左右，每经过一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图。
九、实时荧光定量PCR和梯度PCR有什么区别？
完全两个不同的概念，梯度PCR是指你的PCR仪在设置的时候可以同一时间不同位置设置一个从高到低的温度梯度，以便在不知道退火温度的情况下选择一个最适宜的退火温度。
二实时荧光定量PCR是通过再PCR过程中掺入荧光染料或释放荧光基团，从而对模板进行相对定量或绝对定量的实验，在实时荧光定量PCR时也可以设置梯度，总的来说实时荧光定量PCR是一种实验方法，而梯度PCR是一种实验手段
十、实时荧光定量pcr基线和阈值怎么调整？
不同的仪器是不同的，ABI系列的仪器比较简单，在analysis中设置。
有些仪器好像是不能设置的