一、pcr仪器各个温度的含义?
PCR仪的三种控温模式
在进行PCR仪中控温模式设定时,一般有三个选项:Block、Tube及Probe。下面就这三种模式种简单的介绍:
PCR仪的温度传感器一般是在模块下面的,也就是说仪器实际能够控制的是模块的温度,Block模式指的就是仪器以控制Block的温度为目的,也就是说你输入95度5分钟,则模块的温度达到95度后开始计时,5分钟后完成。这是zui基本的控温模式。
但是,实际上我们输入95度5分钟是希望PCR管内的温度达到95后开始计时5分钟。PCR仪器开发人员可以先将模块温度控制到97度(比如而已,如果不超过95度,管内温度可以很长时间才能达到95度或根本达不到),过几秒钟后,等到管内温度达到95度,再将模块温度降到95度。这样做既达到了管内温度到95度,且速度较快。但过冲的温度量与时间及PCR管的导热系数、PCR反应液的体积都有关系。这就是各个PCR仪厂家的核心技术了。这种控温方式就称为Tube模式。
如果直接将一个温度传感器加入PCR管中,直接测量PCR管内的温度不是也可以吗?这就是Probe模式,也就是在一个不进行PCR反应的管内放入一个温度探头,仪器根据温度探头测到的温度来控制PCR管内的温度。但传感器的数据检测、分析及反馈是需要时间的,这种控制模式不一定比Tube模式好,而且如果反应体积发生变化时,就比较麻烦了。
因此,如今的PCR仪就都是Block和Tube两种模式了。如果是正常的PCR反应,一般选Tube模式。如果是长时间保温且对温度过冲要求很高,则可以考虑用Block模式。
二、pcr技术的温度?
PCR退火温度是一个范围,一般是50度到65度,或者到70度做两步法PCR
三、abi pcr仪器是什么品牌的?
abi pcr仪器是美国ABI公司的品牌,Pcr分析仪。
美国ABI公司 ,全称 Applied Biosystems,中文翻译为“美国应用生物系统公司",是一家全球知名的跨国PCR仪生产厂商,生产了世界上第一台PCR仪,第一台定量PCR仪。
美国ABI公司于2006年7月20日进入中国,成立分公司,称为“爱普拜斯应用生物系统贸易(上海)有限公司”。
四、pcr仪器热盖是怎么加热的?
PCR仪的热盖大致可以分为以下四种:非可调式热盖、可调节式热盖、自适应式热盖和自动式热盖
1、非可调式热盖:即热盖并不能同时适用于高管和矮管,如AB的2720等只能用高管,用矮管得手工加铝块;
2、可调节式热盖:即热盖的高度可以手工调节,同时适用于各种高管和矮管,但压力需要自己感觉,用力过小或过大都可能会有麻烦,如MJ公司的PTC200。因为有这个问题,后来又出了力矩式可调热盖,即热盖旋转到一定力矩后内置机构打滑,从而保证一定的热盖压力。如东胜龙的黑金刚以及Biometra等。这类热盖打开前最好旋松热盖,否则下一个用户如果直接下压热盖,可能造成部分PCR管变型。但很多用户会忘记松热盖。
3、自适应式热盖:即热盖自带预压紧的弹簧,通过与打开和关闭热盖的手柄机构相结合,达到压手柄时自动压紧热盖,开手柄时自动松开热盖,自适应高管和矮管,不用担心压力和没有松开热盖等问题。如东胜龙二代的ETC811型PCR仪。
4、自动式热盖:即热盖是由电机来控制的压紧与松开的。一般用于与实验室自动化相配合的PCR仪,或称为全自动PCR仪,如原MJ公司以及Biometra公司都此类PCR仪,但价格都较高。
五、PCR的退火温度怎么设定?
PCR中退火的那步是引物与模板结合,一般来说,退火温度比Tm值要低上5度左右。另外,也可以根据你设计引物的软件比如primer5.0或Olige 6 推荐的温度。但这些都不是绝对的。
你要是在他的推荐温度下没有目的条带,你可以试试做一个温度梯度,摸索一下退火温度。
六、复性温度对pcr的影响?
复性温度(annealing temperature)是指PCR反应中用于引导引物与DNA模板进行杂交的温度。复性温度的选择对PCR反应的特异性和产物数量有着重要影响。如果复性温度设置过低,可能会导致非特异性杂交和产物数量过多,而过高的复性温度则可能导致引物与DNA模板不能完全杂交,从而影响PCR反应的特异性和产物数量。
因此,复性温度的选择需要根据引物序列和PCR反应体系进行优化。
七、测油温度的仪器?
有多种,根据不同需求可以选择不同的设备。近年来,随着科技的发展,越来越多的智能化测温设备已经投入使用,比如红外线测温仪、温度计、电子温度控制仪等。这些设备都具有高精度、快速响应、易读数等优点,能够更加有效的帮助人们实现油温的测量。
八、测沙子温度的仪器?
品牌:Model 3150红外测沙仪
功能:测量自然水体中的含沙量。
检测对象:水池、江河等自然水体。
原理:红外光传感器发射的红外光照射到含沙水样,根据返回散射光的强弱来分析水体中的含沙量。
泥沙的分布、扩散、沉降会影响港口、航道和生态环境,Insite品牌的3150红外测沙仪是一种测量自然水体中含沙量的仪器。
原理:Model 3150红外测沙仪浑浊的自然水体的光谱反射率比洁净的自然水体的高,当红外光通过悬浮泥沙水体时,溶质要吸收光能,吸收的数量与吸收介质及深度有关,同时泥沙颗粒要对光进行散射。仪器的红外光传感器发射的红外光照射到含沙水样,当红外光通过浑浊液,透射光的强度减弱了。被减弱的光一部分被吸收,一部分被散射到其他方向。红外光在水体中衰减率高,越浑浊的水散射回来的红外光越强。根据返回散射光的强弱来确认水体中的含沙量。含沙量的实时变化转换为大小不同的电信号,载有含沙量信息的电信号经数据采集系统处理并转换为有效信息,终以数字形式被读取,进而分析海水中的含沙量,为海洋水文动力学提供数据。
九、pcr设定温度怎么来的?
pcr温度设定主要是4个依据:
1. DNA变性温度,这个一般而言94~98℃都能保证DNA完全变性,双链分开;
2.DNA复性,这个主要是指引物与模板DNA的复性,通过碱基配对形成双链DNA,因此,复性温度因引物不同而有差别;
3.DNA聚合酶活性,这个来源不同,不同突变,略有差异,一般65~72℃。
4.DNA 保存温度,一般情况下DNA在4~15℃可以稳定保存一定时间。因此,pcr结束后保持在这个温度均可。
十、pcr仪盖子的温度如何设置?
现在pcr仪一般都是热盖pcr仪。热盖的作用是无需加石蜡即可启动pcr反应,其原理是通过加热热盖使pcr tube的盖子达到恒定高温,从而防止pcr过程中反复加热和降温导致tube中的水蒸气冷凝,而导致反应体系中的的水分挥发蒸干,破坏反应体系,影响扩增结果。同时,避免了加入石蜡对pcr后期纯化处理的麻烦。
根据热盖的作用,不难看出热盖的温度略高于水的沸点即可,常规温度设置为105~110度。