一、pcr温度梯度设置?
温度梯度pcr一般主要是指退火温度梯度。如果PCR仪支持的话,一次可以做好几个温度梯度,象AIB的可以做六个,而有些公司的是模仿梯度,比如一边高一边低,这样梯度温度可能误差大一点。如果仪器不支持,可能就麻烦了,想做六个温度就得做六次PCR了。每一次设成不同的温度。
二、pcr仪器各个温度的含义?
PCR仪的三种控温模式
在进行PCR仪中控温模式设定时,一般有三个选项:Block、Tube及Probe。下面就这三种模式种简单的介绍:
PCR仪的温度传感器一般是在模块下面的,也就是说仪器实际能够控制的是模块的温度,Block模式指的就是仪器以控制Block的温度为目的,也就是说你输入95度5分钟,则模块的温度达到95度后开始计时,5分钟后完成。这是zui基本的控温模式。
但是,实际上我们输入95度5分钟是希望PCR管内的温度达到95后开始计时5分钟。PCR仪器开发人员可以先将模块温度控制到97度(比如而已,如果不超过95度,管内温度可以很长时间才能达到95度或根本达不到),过几秒钟后,等到管内温度达到95度,再将模块温度降到95度。这样做既达到了管内温度到95度,且速度较快。但过冲的温度量与时间及PCR管的导热系数、PCR反应液的体积都有关系。这就是各个PCR仪厂家的核心技术了。这种控温方式就称为Tube模式。
如果直接将一个温度传感器加入PCR管中,直接测量PCR管内的温度不是也可以吗?这就是Probe模式,也就是在一个不进行PCR反应的管内放入一个温度探头,仪器根据温度探头测到的温度来控制PCR管内的温度。但传感器的数据检测、分析及反馈是需要时间的,这种控制模式不一定比Tube模式好,而且如果反应体积发生变化时,就比较麻烦了。
因此,如今的PCR仪就都是Block和Tube两种模式了。如果是正常的PCR反应,一般选Tube模式。如果是长时间保温且对温度过冲要求很高,则可以考虑用Block模式。
三、abi pcr仪器是什么品牌的?
abi pcr仪器是美国ABI公司的品牌,Pcr分析仪。
美国ABI公司 ,全称 Applied Biosystems,中文翻译为“美国应用生物系统公司",是一家全球知名的跨国PCR仪生产厂商,生产了世界上第一台PCR仪,第一台定量PCR仪。
美国ABI公司于2006年7月20日进入中国,成立分公司,称为“爱普拜斯应用生物系统贸易(上海)有限公司”。
四、pcr仪器热盖是怎么加热的?
PCR仪的热盖大致可以分为以下四种:非可调式热盖、可调节式热盖、自适应式热盖和自动式热盖
1、非可调式热盖:即热盖并不能同时适用于高管和矮管,如AB的2720等只能用高管,用矮管得手工加铝块;
2、可调节式热盖:即热盖的高度可以手工调节,同时适用于各种高管和矮管,但压力需要自己感觉,用力过小或过大都可能会有麻烦,如MJ公司的PTC200。因为有这个问题,后来又出了力矩式可调热盖,即热盖旋转到一定力矩后内置机构打滑,从而保证一定的热盖压力。如东胜龙的黑金刚以及Biometra等。这类热盖打开前最好旋松热盖,否则下一个用户如果直接下压热盖,可能造成部分PCR管变型。但很多用户会忘记松热盖。
3、自适应式热盖:即热盖自带预压紧的弹簧,通过与打开和关闭热盖的手柄机构相结合,达到压手柄时自动压紧热盖,开手柄时自动松开热盖,自适应高管和矮管,不用担心压力和没有松开热盖等问题。如东胜龙二代的ETC811型PCR仪。
4、自动式热盖:即热盖是由电机来控制的压紧与松开的。一般用于与实验室自动化相配合的PCR仪,或称为全自动PCR仪,如原MJ公司以及Biometra公司都此类PCR仪,但价格都较高。
五、pcr内标法的优点?
pcr内标法的优点是测定的结果较为准确,由于内标物与被测组分的峰面积的比值不受进样量波动影响,因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。
内标法的缺点是操作程序相对烦琐,每次分析时内标物和试样都要准确称量,有时寻找合适的内标物也有困难。
六、lamp法和pcr法的区别?
lamp法
LAMP是Loop-Mediated Isothermal Amplification的缩写,是荣研化学自行开发的快速、简易、精确的基因扩增方法。
具体手法是,对靶基因的6个区域设定4种引物,利用链置换反应使其在一定温度下反应。通过将样品基因、引物、链代换DNA合成酶、底物等混合,在一定温度(65℃附近)保温,反应进行,检测过程仅需一步完成也是其特点。
pcr法
PCR是聚合酶链式反应的简称,是一种酶促化学反应,可以在试管里将待测的目的基因在很短的时间内扩增五十万倍乃至上百万倍,大大提高了基因诊断的灵敏度,降低了分析的难度。PCR法是目前基因诊断中使用最多的方法。
七、简述仪器法的特点?
仪器分析具有以下特点:
①灵敏度高,检出限低。适合于痕量分析以及超痕量分析。
滴定分析中络合滴定法的测量范围一般为0.1M-0.001 M;而ICP-MS测量范围为ppm-ppt级别。
②选择性好。
化学分析中选择性最好的络合滴定依然有很多干扰,需要繁琐的掩蔽、还原等方法去处干扰。
仪器分析可以通过选择或者调整测定条件使共存组分不产生干扰。
③操作简单,分析速度快,易实现自动化。
化学分析所需时间长,操作繁琐,比如重量分析法一次试验需要3~5 h。
原子吸收光谱分析一次样品仅仅需要几分钟。
④相对误差较大。
化学分析一般用于常量以及高含量成分分析,误差一般小于千分之几。仪器分析误差较大,一般在5%左右,不适合常量分析。
⑤需要价格昂贵的仪器。
HPLC-ICP-MS联用是目前应用最好的形
八、pcr和等温扩增法的区别?
pcr是Pcr而等温扩增法是等温扩增法。
九、仪器观察法的优点?
1、观察法的优点:
1)它能通过观察直接获得资料,不需其他中间环节。因此,观察的资料比较真实。
2)在自然状态下的观察,能获得生动的资料。
3)观察具有及时性的优点,它能捕捉到正在发生的现象。
4)观察能搜集到一些无法言表的材料。
2、观察法也同其他科研方法一样,有自身的局限性。
1)受时间的限制,某些事件的发生是有一定时间限制的,过了这段时间就不会再发生。
2)受观察对象限制。如研究青少年犯罪问题,有些秘密团伙一般不会让别人观察的。
3)受观察者本身限制。一方面人的感官都有生理限制,超出这个限度就很难直接观察。
十、pcr法检测基因的单位写什么?
ams探针法,荧光定量pcr。一般测snp用的,灵敏度较普通rtpcr高。