一、pcr仪器各个温度的含义？
PCR仪的三种控温模式
在进行PCR仪中控温模式设定时，一般有三个选项：Block、Tube及Probe。下面就这三种模式种简单的介绍：
PCR仪的温度传感器一般是在模块下面的，也就是说仪器实际能够控制的是模块的温度，Block模式指的就是仪器以控制Block的温度为目的，也就是说你输入95度5分钟，则模块的温度达到95度后开始计时，5分钟后完成。这是zui基本的控温模式。
但是，实际上我们输入95度5分钟是希望PCR管内的温度达到95后开始计时5分钟。PCR仪器开发人员可以先将模块温度控制到97度（比如而已，如果不超过95度，管内温度可以很长时间才能达到95度或根本达不到），过几秒钟后，等到管内温度达到95度，再将模块温度降到95度。这样做既达到了管内温度到95度，且速度较快。但过冲的温度量与时间及PCR管的导热系数、PCR反应液的体积都有关系。这就是各个PCR仪厂家的核心技术了。这种控温方式就称为Tube模式。
如果直接将一个温度传感器加入PCR管中，直接测量PCR管内的温度不是也可以吗？这就是Probe模式，也就是在一个不进行PCR反应的管内放入一个温度探头，仪器根据温度探头测到的温度来控制PCR管内的温度。但传感器的数据检测、分析及反馈是需要时间的，这种控制模式不一定比Tube模式好，而且如果反应体积发生变化时，就比较麻烦了。
因此，如今的PCR仪就都是Block和Tube两种模式了。如果是正常的PCR反应，一般选Tube模式。如果是长时间保温且对温度过冲要求很高，则可以考虑用Block模式。
二、pcr温度梯度设置？
温度梯度pcr一般主要是指退火温度梯度。如果PCR仪支持的话，一次可以做好几个温度梯度，象AIB的可以做六个，而有些公司的是模仿梯度，比如一边高一边低，这样梯度温度可能误差大一点。如果仪器不支持，可能就麻烦了，想做六个温度就得做六次PCR了。每一次设成不同的温度。
三、pcr仪设置温度原理？
在pcr反应过程中，要使用三个不同的温度变化，有变性，退火，扩增三个不同的反应阶段，而这三个反应需要的最适温度不同。具体设置如下：
1、变性反应温度的设置
当温度控制在90 °C以上时DNA会发生变性，双链DNA解链成单链。
2、退火反应温度的设置
当温度下降到50 °C的时候，DNA复性，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
3、扩增反应温度的设置
当温度上升到72 °C左右时延伸，DNA 聚合酶在此时有最大活性，能够催化4 种脱氧核苷酸合成新的DNA链。
四、pcr仪怎么设置温度降落？
一般退火温度为从Tm+5度降落至Tm-10度，每度2个cycle，最后在tm-10度上增加5-10个cycle.例：Tm为58度，则从63度降落到48度，每度2个cycles,最后在48度加5-10个cycles。如果效果不好，可以再微调。
五、pcr仪怎样设置固定温度？
您可以通过操作PCR仪的控制面板来设置固定温度。首先，打开PCR仪并选择温度控制模式。
然后，输入您想要设置的温度值，通常以摄氏度为单位。
接下来，确认设置并启动PCR仪以使其达到您所设定的温度。在达到目标温度后，PCR仪会自动维持该温度直至您进行其他操作或程序结束。
另外，一些PCR仪还可提供温度均衡功能，可以在设定的固定温度附近进行微小波动。务必在使用PCR仪前仔细阅读使用手册，以确保正确设置固定温度并确保实验顺利进行。
六、做pcr，如何确定最佳退火及延伸的时间和温度？
退火的目的是为了使引物和DNA单链结结合，所以退火温度一定要低于目的DNA和引物的熔点温度。
一般情况下引物的熔点温度为40~70度，熔点温度的高低与引物的大小与G+C的比例有关。延伸的温度取决于DNA聚合酶的最适温度，聚合的错配率，引物的熔点温度。最常使用的延伸温度为72度。但是根据你要扩增的产物与引物还是会有差距。七、pcr仪盖子的温度如何设置？
现在pcr仪一般都是热盖pcr仪。热盖的作用是无需加石蜡即可启动pcr反应，其原理是通过加热热盖使pcr tube的盖子达到恒定高温，从而防止pcr过程中反复加热和降温导致tube中的水蒸气冷凝，而导致反应体系中的的水分挥发蒸干，破坏反应体系，影响扩增结果。同时，避免了加入石蜡对pcr后期纯化处理的麻烦。
根据热盖的作用，不难看出热盖的温度略高于水的沸点即可，常规温度设置为105～110度。
八、荧光定量pcr怎么设置退火温度？
最好也最快的方法是做个梯度PCR，马上能选出最优退火温度
九、pcr仪为什么设置保存温度？
PCR仪器不是一种计量仪器，其主要作用原理与基本计量要素密切相关，要求较高，一旦失控，仪器将不能正常工作，所以PCR仪器也需要定期检测和维护，这对依赖自然风降温的PCR仪器尤为重要。
样品池的清洗先打开盖子，然后用95%乙醇或10%清洗液浸泡样品池5min，然后清洗被污染的孔；用微量移液器吸取液体，用棉签吸干剩余液体；打开PCR仪，设定保持温度为50℃的PCR程序并使之运行，让残余液体挥发去除。一般5～10min即可。
十、pcr温度设置的6个阶段？
PCR反应程序指的是：PCR由变性-退火-延伸三个基本反应步骤构成：
1、模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
2、模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
3、延伸：DNA聚合酶由降温时结合上的引物开始沿着DNA链合成互补链。
此阶段的温度依赖于DNA聚合酶。
该步骤时间依赖于聚合酶以及需要合成的DNA片段长度。
传统的Taq估计合成1000bp大概需要1分钟、较新的Tbr（来自于嗜热菌Thermus brockianus）约40秒、商业公司生产的融合型聚合酶仅需约10-15秒。有修正功能的则会比较慢。