一、荧光定量pcr怎么设置退火温度？
最好也最快的方法是做个梯度PCR，马上能选出最优退火温度
二、荧光定量pcr原理？
荧光定量PCR是一种基于PCR技术的、灵敏、精确、可定量检测DNA的方法。其原理是，在PCR过程中加入荧光染料，当靶基因扩增到一定数量时，荧光信号达到了可检测的阈值，就可以通过荧光信号的强度来定量检测目标基因的存在量。荧光信号的增长可以直接反映PCR产物的数量，可以准确计算出靶基因的起始浓度。此外，该技术还可以通过不同荧光染料的选择，实现多靶点同时检测，从而提高检测效率。总之，荧光定量PCR技术的原理是通过荧光信号来实现基因数量的定量测定，具有高灵敏度、高精度和高通量等优点，是现代生物技术和生物医学研究中重要的实验手段之一。
三、荧光定量PCR技术？
实时检测PCR扩增，在扩增的指数期对起始模板进行定量，在扩增过程中，荧光信号随着PCR产物的增加而增强。我们实验室使用的BIOGHSC Super Probe Kit PCR实验检测DNA,测得的循环数在28左右，整个PCR过程有4个阶段，基线期---指数增长期---线性增长期---平台期，指数增长期内，PCR有高度重复性，一般的检测指标是看线性图谱的扩增曲线的起跳值（CT值）。
四、荧光定量pcr模板是？
在实时荧光PCR中。模板的定量有2种方法：绝对定量和相对定量。
绝对定量一般通过已知的标准曲线来确定我们所感兴趣基因的拷贝数； 相对定量指在一定样品中靶序列相对于另一参照序列的量的变化. 如果你做的是DNA的定量，可以用DNA 模板。
你用质粒作为标准品做标准曲线，最后可以换算出来拷贝数，这是绝对定量。
如果是做转录，表达量的变化，需要提取RNA，反转录为cDNA，然后再做相对定量。
五、pcr荧光定量检测方法？
SYBR Green I 是一种能与双链 DNA 结合发光的荧光染料。其与双链 DNA 结合后， 荧光大大增强。因此， SYBR Green I 的荧光信号强度与双链 DNA 的数量相关，可以根据荧光信号检测出 PCR 体系存在的双链 DNA 数量。
SYBR Green I 的最大吸收波长约为 497 nm，发射波长最大约为 520 nm。PCR 扩增程序一般为 94℃～55℃～72℃三步法，40 个循环。
六、pcr荧光定量仪自动阈值怎么设置？
不同的仪器是不同的，ABI系列的仪器比较简单，在analysis中设置。
有些仪器好像是不能设置的
七、ABI各型号荧光定量PCR仪器各有何优缺点？
进口的有：ABI的，BIO-RAD的iQ5 Applied Biosystems公司的7700型实时荧光定量PCR仪是全球公认的荧光定量PCR的金标准 BIONEER：国内的用户可能听说过这个品牌的不多，只有早期较多使用进口引物的实验室和研究所或留美学者知道这个品牌。
Bioneer最。八、数字PCR和荧光定量PCR的区别？
数字pcr和荧光pcr哪个更准确在定量PCR时，我们常常纠结一个问题，究竟是相对定量还是绝对定量呢？如今，你无需纠结了，因为数字PCR（digitalPCR）来了。尽管这两种技术有些类似，都是估计起始样品中的核酸量，但它们有一个重要的区别。
定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量，而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数，是对起始样品的绝对定量。
因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域：拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究（如等位基因不平衡表达）、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
九、荧光定量PCR技术有哪些优点呢？荧光定量P？
普通的PCR大多数是定性实验，而实时荧光定量PCR则定量和定性都可以做。应用领域也不一样，普通PCR一般应用于基因组克隆、DNA测序、RNA反转录等，而实时荧光定量PCR一般应用于mRNA表达量分析、绝对定量、蛋白表达、SNP分析、阴阳性解析等领域。不是定量PCR比PCR好，而是两者应用与不同的领域，起到了不同的作用。荧光定量PCR较普通PCR不同的一点就是可以实时检测PCR扩增产物，从而可进行绝对定量或者相对定量。
十、荧光定量PCR是什么检查？
荧光定量只是一种测试方法，根据需要可以进行多种检查。
在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针，通过检测荧光信号，实时监测整个PCR反应过程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。