一、mrna转录原理?
转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。
与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA合成酶作为催化剂,合成前体mRNA。
在体内,转录是基因表达的第一阶段,并且是基因调节的主要阶段。转录可产生DNA复制的引物,在反转录病毒感染中也起到重要作用。
二、mrna转录的复制和解旋方式?
在转录过程中,DNA模板被转录方向是从3′端向5′端;RNA链的合成方向是从5′端向3′端。RNA的
转录过程
合成一般分两步,第一步合成原始转录产物(过程包括转录的启动、延伸和终止);第二步转录产物的后加工,使无生物活性的原始转录产物转变成有生物功能的成熟RNA。但原核生物mRNA的原始转录产物一般不需后加工就能直接作为翻译蛋白质的模板。
三、DNA转录为mrna的基本过程?
在RNA聚合酶的催化下,以DNA为模板合成mRNA的过程称为转录。在双链DNA中,作为转录模板的链称为模板链或反义链;而不作为转录模板的链称为编码链或有义链,编码链与模板链互补,它与转录产物的差异仅在于DNA中的胸腺嘧啶(T)变为RNA中的尿嘧啶(U)。
在含许多基因的DNA双链中,每个基因的模板链并不总是在同一条链上,亦即可作为某些基因模板链的一条链,同时也可以是另外一些基因的编码链。
如细菌基因的负调控机制是当一种阻遏蛋白结合在受调控的基因上时,基因不表达;而从靶基因上去除阻遏蛋白后,RNA聚合酶识别受调控基因的启动子,使基因得以表达,这是正调控。这种阻遏蛋白是反式作用因子。
四、mrna反转录的步骤及原理?
是: mRNA反转录是将RNA转录成cDNA的过程。 在分子生物学和基因工程学中,需要分离和分析基因或mRNA,但由于RNA比DNA不稳定,且存在脱落和分解的风险,因此需要将RNA转录成稳定且易于储存的cDNA。mRNA反转录是一种将RNA转录成cDNA的技术,常用于基因克隆和表达研究中。mrna反转录的步骤:1. 首先,需要从细胞总RNA中纯化目标mRNA,这可以通过聚丙烯酰胺凝胶电泳、磁珠等方法实现。2. 加入Oligo(dt)寡核苷酸为引物,即在反转录过程中,它可以与目标mRNA上的polyA序列结合,为反转录过程提供一个起始点。3. 制备反转录混合物,其中包括引物、RNase抑制剂、反转录酶和dNTP等。4. 将混合物加入RNA模板中,进行反转录反应。5. 通过PCR扩增,多样性PCR(DD-PCR)、实时PCR等方法进行后续操作。反转录是利用反转录酶将RNA转录成cDNA的过程。在这个过程中,Oligo(dt)引物作为“起始点”,可以保证cDNA的完整性。RNase抑制剂可以抵御RNase的分解,以保证RNA反转录反应的成功。dNTP是反转录加入到扩增反应中的一种重要原料,可作为PCR扩增的载体。因此,只有在反转录中正确处理好每一个步骤,才能获得高质量和合适的cDNA。
五、mRNA从DNA哪端开始转录?
反义链和有义链(sense strand)在以前的概念和现今的使用之间存在有一些混乱,从概念上说在基因的DNA双链中,转录时作为mRNA合成模板的那条单链叫做模板链或反义链(template or sense strand),而转录时不能作为mRNA合成模板的那条单链叫有义链,但为了使用上的方便,现今通常将mRNA看作是有义分子(sense molecule)而将与mRNA序列一致的DNA单链(假定DNA中的T替代mRNA的U)标为有义链,在文献中,这条与mRNA序列一致的DNA单链序列被用作基因序列.该序列的5’端称之为上游(upstream)3’端称之为下游(downstream).
六、mRNA反转录形成cDNA的步骤?
有反转录酶,可以以RNA为模版合成DNA。 这过程需要引物,根据mRNA有3‘polyA尾巴的特点,可以用oligo-dT作为引物,合成cDNA,这样可以自然去除非mRNA的RNA的转录。 也可以用随机引物去合成大量不同的cDNA。 如果要反转录特定的mRNA,就根据它设计特异性引物反转录,这样理论上只有目的cDNA产生。
七、mrna的转录和trna的转录一样吗?
mRNA的功能是提供蛋白翻译的模板,而tRNA是通过折叠并与特定蛋白结合成转运氨基酸的转运复合体,tRNA都是由专门的基因编码的。
八、DNA双链都可以转录mRNA么?
反义链和有义链(sense strand)在以前的概念和现今的使用之间存在有一些混乱,从概念上说在基因的DNA双链中,转录时作为mRNA合成模板的那条单链叫做模板链或反义链(template or sense strand),而转录时不能作为mRNA合成模板的那条单链叫有义链,但为了使用上的方便,现今通常将mRNA看作是有义分子(sense molecule)而将与mRNA序列一致的DNA单链(假定DNA中的T替代mRNA的U)标为有义链,在文献中,这条与mRNA序列一致的DNA单链序列被用作基因序列.该序列的5’端称之为上游(upstream)3’端称之为下游(downstream).
九、检测目的基因是否转录出mRNA的方法?
可以杂交的,DNA中的一条链能跟RNA杂交 .RNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤,G鸟嘌呤,C胞嘧啶,U尿嘧啶.DNA的碱基主要有4种,即A腺嘌呤,G鸟嘌呤,C胞嘧啶,T胸腺嘧啶同样遵循碱基互补配对规律A和U,G和C,T和A检测用的dna应该是目的基因,假若与RNA完全吻合,就是没有出现弯曲,就证明结论
十、真核生物mRNA转录后修饰有哪些方式?
真核生物mRNA转录后进行加工的方式如下: 真核生物编码蛋白质e799bee5baa6e4b893e5b19e31333431353936的基因以单个基因为转录单位,但有内含子,需切除。
信使RNA的原初转录产物是分子量很大的前体,在核内加工时形成大小不等的中间物,称为核内不均一RNA(hnRNA)。
其加工方式包括: 1、5’端加帽子: 在转录的早期或转录终止前已经形成。
首先从5’端脱去一个磷酸,再与GTP生成5’,5’三磷酸相连的键,最后以S-腺苷甲硫氨酸进行甲基化,形成帽子结构。
帽子结构有多种,起识别和稳定作用。
2、 3’端加尾: 在核内完成。
先由RNA酶III在3’端切断,再由多聚腺苷酸聚合酶加尾。
尾与通过核膜有关,还可防止核酸外切酶降解。
3、 内部甲基化: 主要是6-甲基腺嘌呤,在hnRNA中已经存在。
可能对前体的加工起识别作用。