保藏菌种的方法有哪些?

admin 泰里仪器网 2024-10-19 06:51 0 阅读

一、保藏菌种的方法有哪些?

保存方法:

(一)培养基保存法

利用各种斜面和半固体培养基,加上石蜡油保存菌种,是一种最常用而又简易的保存方法。

1.普通琼脂斜面保存法:肠道杆菌、葡萄球菌等一般细菌可接种于不含糖的普通琼脂斜面上,斜面底部应加少许无糖肉膏汤,以防干涸。经35℃培养18~24h后,移种于4℃冰箱中,一般可保存一个月,每月传代一次。

2.血液琼脂斜面保存法:链球菌、肺炎链球菌应接种于血液琼脂斜面上,35℃培养生长后,置4℃冰箱中保存,链球菌须半个月至1个月移种一次,肺炎链球菌的新分离菌株须2~4天移种一次,以后逐渐延长移种时间,在适应后可延至半个月移种一次。

3.巧克力色斜面保存法:宜保存脑膜炎奈瑟菌,并在35℃孵箱中保存,一般每2天移种一次。

4.鸡蛋斜面保存法:适于保存含有Vi抗原的沙门菌属及其他含表面抗原的细菌,一般可保存一个月。

5.半固体穿刺保存法:将细菌接种于琼脂半固体或血清琼脂半固体内,经35℃培养18~24h,再以无菌方法加入灭菌的液体石蜡。高度约lcm,置4℃冰箱保存。保存时间可达3~6个月。

(二)干燥保存法

原理是将细菌体内的水分蒸发掉,使其处于休眠和代谢停滞状态,从而达到长期保存菌种的目的医|学教|育网搜集整理。菌种干燥后低温保存,可保存数年至十几年。

(三)冷冻干燥保存法

本法又称冷冻真空干燥法。它综合利用了各种有利于菌种保存的因素(低温、干燥和缺氧等),是目前最有效的菌种保存方法之一。用本法保存的菌种具有成活率高,变异性小等优点,保存期一般3~5年,有的可长达10年以上。

二、常用的菌种保藏方法有哪些?

菌种保存的方法有斜面低温保藏法、液体石蜡覆盖保藏法、沙土保藏法、滤纸保藏法、甘油管保存法、冷冻干燥保存法。1、斜面低温保藏法:将菌种接种到适合的固体斜面培养基上,用油纸将棉塞部分包扎好,然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。2、液体石蜡覆盖保藏法:使用液体石蜡将斜面菌覆盖住,使其和空气隔绝。

一、菌种保存的方法有哪些

1、斜面低温保藏法

(1)将菌种接种到适合的固体斜面培养基上,等到菌种充分生长过后,使用油纸将棉塞部分包扎好,然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。

(2)如果是霉菌、放线菌及有芽孢的细菌,一般可以保存2-4个月左右,需要移种一次。如果是酵母菌,一般可以保存2个月左右,需要每个月移种一次。

2、液体石蜡覆盖保藏法

(1)将液体石蜡装在三角烧瓶中,并使用棉塞塞好,用牛皮纸进行包扎,然后在0.1MPa,121.3℃的环境下灭菌30分钟左右,接着将其放置在40℃的温箱之中,将水汽蒸发掉。

(2)将需要保藏的菌种,用适合的斜面培养基进行培养,得到健壮的孢子或者是菌体。

(3)使用灭菌过的吸管将液体石蜡吸出,注入斜面上,用量为高出斜面顶端1cm左右为宜。

(4)将试管直立,放置在低温或者是室温之下进行保存。

(5)霉菌、放线菌、芽孢细菌可以保藏2年以上不死,酵母菌可以保藏1-2年,一般无芽孢细菌可以保藏1年,脑膜炎球菌可以保藏3个月左右(37℃环境下)。

3、沙土保藏法

(1)准备好河沙,加入10%稀盐酸,然后加热煮沸30分钟左右,将里面的有机质去掉,然后将酸水倒掉,用自来冲洗至ph为中性,接着烘干,过筛(40目筛子),去掉粗颗粒。

(2)准备好非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土,浸泡洗涤数次,直至ph为中性,然后烘干,碾碎,过筛(100目筛子),去掉粗颗粒。

(3)将沙和土按照2:1的比例混合,装入试管或者是安瓿管中,塞好棉塞,在1212℃的环境下灭菌30分钟左右。

(4)将菌种在斜面培养基中培养,得到健壮的菌体,然后向斜面培养物中注入3-5ml无菌水,洗下细胞或孢子制成菌悬液。

(5)使用灭菌过的吸管吸取菌悬液,然后均匀滴入沙土管中(0.2-0.5ml/管)。如果是放线菌或霉菌,可以直接挑取孢子拌入沙土管中。

(6)真空抽去沙土管中的水分。

(7)将沙土管用火焰熔封,然后存放在低温(4-6℃)干燥处保藏,或者是将沙土管用牛皮纸或塑料纸包好,放置在干燥器内保存。

三、菌种斜面低温保藏法有哪些?

将需要保藏的菌种,接种在适宜的斜面培养基上,菌丝长满斜面时,用硫酸纸包扎棉塞或者硅胶塞,放置在4℃的冰箱中保藏,叫做斜面(菌种)低温保藏法。由于微生物的新陈代谢活动未停止,试管内培养基易失水变干。因此,保藏时间较短,不适于长期保藏。每隔3~6个月应转管一次。

草菇菌种不耐低温,需保藏在10~12℃之间。或在草菇菌落上灌注3~4毫升的防冻剂(10%的甘油)。

当菌丝长满斜面后,在无菌条件下,用无菌橡皮塞代替棉塞,并用石蜡密封,即可在室温或冰箱中保藏。

这种方法可防止杂菌污染,隔绝氧气,避免培养基干燥,使用方便。

据测定,保藏3年的菌种生活力仍很旺盛。

四、菌种保藏的依据?

菌种保藏是一切微生物工作的基础,其目的:是使菌种被保藏后不死亡、不变异、不被杂菌污染,并保持其优良性状,以利于生产和科研应用。菌种保藏的原理:是为了达到长期保持菌种的优良特性,核心问题是必须降低菌种变异率,而菌种的变异主要发生于微生物旺盛生长、繁殖过程,因此必须创造一种环境,使微生物处于新陈代谢最低水平,生长繁殖不活跃状态。

常用的方法主要有:常规转接斜面低温保藏法,半固体穿刺保藏法,液体石蜡保藏法,含甘油培养物保藏法等,沙土管保藏法。

特殊的有:真空冷冻干燥保藏法和液氮超低温保藏法。

五、临时保藏菌种的温度?

保藏方法:将菌种接种到固体斜面培养基上,然后在适宜的温度下进行培养,当菌落长成之后,将试管放置于冰箱中(4°C)进行保藏即可。

六、临时保藏菌种的方法?

可以在固体斜面培养基上菌落长成后,放入冰箱低温保藏;或者用液体石蜡覆盖保藏法;还可以将微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。

七、atcc菌种保藏方法有什么特点?

atcc菌种保藏方法有:

(1)斜面低温保藏。是一种最常用、最简便的菌种保藏方法。首先将需要保藏的菌种接到斜面培养基上,在适宜的温度条下培养,当菌丝健壮地长满斜面时,即将此试管菌种取出,放置于4 ℃的冰箱中保藏。

特点:①简单易行,是目前生产及科研普遍采用的一种方法;②保藏时间短,需6个月转接一次,转管次数多菌丝变异的可能性大;③如改用橡皮塞并用石蜡扣,可保藏1年~3年。

(2)液体石蜡保藏。液体石蜡保藏也称为矿油保藏,即用矿油覆盖试管斜面试管保藏的方法。矿油是指无色、透明、黏稠、性质稳定、不易被微生物分解的石蜡油和液体石蜡,将其覆盖在斜面菌种之上,可以隔绝空气,防治培养基水分蒸发,抑制微生物的代谢活动,推迟细胞老化,从而达到长期保藏菌种的目的。

特点:①方法简便易行,保藏条件不严格,保藏时间长,可作为长期保藏菌种的方法;②菌种必须垂直放,放置不方便。

(3)滤纸保藏。滤纸保藏是一种以无菌滤纸作为菌孢子吸附载体长期保藏菌种的方法,又称滤纸孢子保藏法。

特点:技术要求高,设备费用大,菌种不易衰老退化,菌种保藏时间长很少变异。

(4)自然基质保藏。自然基质保藏就是以不含毒性、刺激性和抑菌性而富含营养的自然生长的基质作培养基来保藏菌种的方法。特点:方法简便易行,保藏时间长。

八、解磷菌种保藏的方法?

传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。很多微生物在低温或者干燥处理时,会很快死亡,为了保存菌种的活性,就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。

九、菌种保藏技术的应用前景?

应用前景广阔。现在菌种保藏技术是拥有无限潜力和发展机会的。

十、菌种保藏的原理是什么?

菌种保藏的原理是通过减速细胞活动、延缓代谢水平来维持菌株存在的状态,以避免菌株的死亡和变异。1. 菌株在保存过程中会处于一种休眠状态,细胞活动减缓,以降低代谢水平,从而避免营养物质的消耗和菌株死亡。2. 通过降低保存环境的温度和添加防护剂等方法,延缓菌株的代谢水平,保持其保存状态的稳定性,以进行长时间的保藏。菌种保藏的方法包括液体冷冻、干燥保存、低温保存等,可以长期保护菌种的稳定性和纯度,使其长期保存和维护相关特性。

The End
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