一、柱色谱中常用的吸附剂有哪些?
柱色谱中常用的吸附剂有:
⑴氧化铝: 市售的层析用氧化铝有碱性、中性和酸性三种类型,粒度规格大多为100~150目。
碱性氧化铝 (pH 9-10)适用于碱性物质 (如胺、生物碱)和对酸敏感的样品(如缩醛、糖苷等),也适用于烃类、甾体化合物等中性物质的分离。但这种吸附剂能引起被吸附的醛、酮的缩合。酯和内酯的水解、醇羟基的脱水、乙酰糖的去乙酰化、维生素A和K等的破坏等不良副反应。所以,这些化合物不宜用碱性氧化铝分离。
酸性氧化铝 (pH 3.5-4.5)适用于酸性物质如有机酸、氨基酸等的分离。
中性氧化铝 (pH 7-7.5)适用于醛、酮、醌、苷和硝基化合物以及在碱性介质中不稳定的物质如酯、内酯等的分离,也可以用来分离弱的有机酸和碱等。
⑵硅胶: 硅胶是硅酸的部分脱水后的产物,其成分是SiO2·xH2O,又叫缩水硅酸。柱色谱用硅胶一般不含粘合剂。
⑶聚酰胺: 聚酰胺是聚己内酰胺的简称,商业上叫做锦纶、尼龙-6或卡普纶。色谱用聚酰胺是一种白色多孔性非晶形粉末,它是用锦纶丝溶于浓盐酸中制成的(制法详见附录十)。不溶于水和一般有机溶剂,易溶于浓无机酸、酚、甲酸及热的乙酸、甲酰胺和二甲基甲酰胺中。聚酰胺分子表面的酰氨基和末端胺基可以和酚类、酸类、醌类、硝基化合物等形成强度不等的氢键,因此可以分离上述化合物,也可以分离含羟基、氨基、亚氨基的化合物及腈和醛等类化合物。
⑷硅酸镁: 中性硅酸镁的吸附特性介于氧化铝和硅胶之间,主要用于分离甾体化合物和某些糖类衍生物。为了得到中性硅酸镁,用前先用稀盐酸,然后用醋酸洗涤,最后用甲醇和蒸馏水彻底洗涤至中性。
二、吸附色谱的发明?
色谱法起源于20世纪初,1906年由俄国植物学家米哈伊尔·茨维特发明。
三、吸附色谱的原理?
吸附色谱法常叫做液-固色谱法,它是基于在溶质和用作固定固体吸附剂上的固定活性位点之间的相互作用。可以将吸附剂装填于柱中、覆盖于板上、或浸渍于多孔滤纸中。
吸附剂是具有大表面积的活性多孔固体,例如硅胶、氧化铝和活性炭等。活性点位例如硅胶的表面硅烷醇,一般与待分离化合物的极性官能团相互作用。
分子的非极性部分(例如烃)对分离只有较小影响,所以液-固色谱法十分适于分离不同种类的化合物(例如,分离醇类与芳香烃)。
四、吸附柱色谱的基本原理是什么?
吸附色谱的原理:在一定条件下,硅胶与被分离物质之间产生作用,这种作用主要是物理和化学作用两种.物理作用来自于硅胶表表面与溶质分子之间的范德华力.化学作用主要是硅胶表面的硅羟基与待分离物质之间的氢键作用。
色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果。
除另有规定外,通常多采用直径为0.07~0.15mm的颗粒。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱时的流速,均按各品种项下的规定。
五、铁离子在吸附色谱柱是什么颜色?
铁离子([Fe(H2O)6])的检验方法:
(1)加苯酚显紫红色(络合物)
(2)加SCN(离子) 显血红色 (络合物)
(3)加氢氧化钠有红褐色沉淀,从开始沉淀到沉淀完全时溶液的pH(常温下):2.7~3.7
(4)NH4SCN试法:
[Fe(H2O)6]与SCN生成血红色具有不同组成的络离子。碱能分解络合物,生成Fe(OH)3沉淀,故反应需要在酸性溶液中进行。HNO3有氧化性,可使SCN受到破坏,故应用稀HCl溶液酸化试液。其他离子在一般含量时无严重干扰。
(5)K4[Fe(CN)6]试法:
[Fe(H2O)6]在酸性溶液中与K4[Fe(CN)6]生成蓝色沉淀(以前为普鲁士蓝),但实际上它与前述滕氏蓝系同一物质。其他阳离子在一般含量时不干扰鉴定。Co、Ni等与试剂生成淡蓝色至绿色沉淀,不要误认为是[Fe(H2O)6]。
六、硅胶柱色谱和凝胶柱色谱的区别?
主要区别在于填料类型、柱子大小、吸附(扩散)原理以及分离物质不同。硅胶柱层析原理:硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。凝胶柱色谱也称为凝胶过滤色谱、分子筛色谱、凝胶渗透色谱(GPC)、排阻色谱。它主要是利用凝胶网状结构的分子筛作用,根据被分离物分子大小不同进行分离。具有的优点有分离条件温和,适用于不稳定的分子; 样品回收率高,几乎可达100%; 重复性高; 操作的时间相对较短,所需要的设备简单、经济
葡聚糖凝胶柱层析,其主要用于分离黄酮类化合物
七、吸附柱色谱的分离效果与哪些因素有关?
色谱柱的型号有很多,但是不外乎以下几种:
1.正向(硅胶、氨基、腈基)、反向柱(ODS、C8、C4)
2.凝胶柱(分子筛作用)
3.手性柱(拆分异构体)
4.Hilic(高极性亲水柱)流动相:水、甲醇、乙腈。PE、EA等,并且包含缓冲盐溶液其他:色谱柱填料颗粒大小,柱温、流速上面的是分离的色谱条件,如果只是任意的两种待测物,那么理论上应该可以通过实验排列组合以上因素获得待测物质的基线分离。
八、正相色谱柱与反相色谱柱的区别?
色谱都是遵循分配原理,化合物的极性接近流动相就容易被洗脱,接近固定相就容易被保留,正相反相都遵循这个原则。
早期的色谱流动相极性低于固定相,后来发展出的烷基键合相作为固定相的色谱,流动相极性高于固定相,正好和原来的反过来,就被称作“反相”了,完全是历史原因,色谱分配原理是一样的
九、色谱柱的选择?
一、选择色谱柱时,首先根据其所需要进行成分含量分析的样品进行大致的类型分类,例如可以根据分离规模来进行选择色谱柱的类别,如色谱柱根据其直径的大小尺寸不同具有非常多的型号。如直径较大的是制备柱,它的尺寸一般大于10mm,还有分析柱的直径尺寸大概是2-5mm,一些微型柱,包括有 毛细管柱等。
二、其次,可以从需要分析样品的物理和化学性质入手,如在选柱前提前找好关于该物质的资料,包括其分子量、溶解性、是否会出现解离现象等等详细的信息,然后根据这些找出合适的色谱柱类型。如脂溶性的样品适合的色谱柱是调料式的孔径,推荐选择成都摩尔科学仪器有限公司提供的4款正相色谱柱(正相色谱柱HP-Cyano,正相色谱柱HP-Silica,正相色谱柱HP-Diol,正相色谱柱HP-Amino)而水溶性非离子型的则比较适合反向色谱柱等。成都摩尔科学仪器有限公司有多款反相色谱柱提供给大家选择。如有需要欢迎拨打028-85115092;
三、当具体到选择哪一款色谱柱时,应当保证填料所能耐受的ph范围符合分析条件的要求。因为如果其硅胶材质不与需要测量的样品的酸碱值不能够相适应,就会发生键合相水解或者是硅胶溶解的多种现象,当然其填料的孔径也要选择与色谱柱相适应的,不然很可能会导致分析结果不准确。成都摩尔科学仪器有限公司提供的色谱柱能够满足市场上百分99以上的需求:如经典的成都摩尔科学仪器有限公司提供的赛分科技研发生产的GP-18色谱柱,HP-C18色谱柱。
十、柱色谱的目的?
柱色谱法,又称层析法。是一种以分配平衡为机理的分配方法。色谱体系包含两个相,一个是固定相,一个是流动相。当两相相对运动时,反复多次地利用混合物中所含各组分分配平衡性质的差异,最后达到彼此分离的目的。色谱法从发明到现在已有八十多年的历史。它是纯化和分离有机或无机物的一种常用方法。其中固定相极性大于流动相的色谱为正相色谱,相反的为反相色谱。
根据相似相溶原理:混合物中在固定相中溶解度大的物质后出柱,保留时间长,难被洗脱。