一、金迪安pcr仪器操作说明书?
一)试剂PCR仪
1.引物:决定扩增的特异性。根据检测的DNA不同,选用不同引物,每种病原微生物都有自己特异的引物。
2.耐热的DNA聚合酶:此酶是从耐热细菌中分离出来的,能耐受高温90℃-100℃。
3.10×PCR缓冲液:500mmol/l KCl;100mmol/L Tris-HCl(pH8.4,20℃)150mmol/L MgCl2,1mg/ml明胶。10×PCR缓冲液随酶一起购买。
4.5mmol/L dNTP贮备液:将dATP、dCTP、dGTP和dTTP钠盐各100mg合并,加入灭菌去离子水溶解,用NaOH调pH至中性,分装每份300μl,-20℃保存。dNTP浓度用UV吸收法测定。现用dNTP溶液均有商品化产品。
5.DNA模板:用处理液将待测标本处理,不同处理方法、操作各异,但目的是暴露标本中被检测的DNA。
二、pcr仪器 全名?
pcr仪是光度计,
分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。
三、pcr仪器各个温度的含义?
PCR仪的三种控温模式
在进行PCR仪中控温模式设定时,一般有三个选项:Block、Tube及Probe。下面就这三种模式种简单的介绍:
PCR仪的温度传感器一般是在模块下面的,也就是说仪器实际能够控制的是模块的温度,Block模式指的就是仪器以控制Block的温度为目的,也就是说你输入95度5分钟,则模块的温度达到95度后开始计时,5分钟后完成。这是zui基本的控温模式。
但是,实际上我们输入95度5分钟是希望PCR管内的温度达到95后开始计时5分钟。PCR仪器开发人员可以先将模块温度控制到97度(比如而已,如果不超过95度,管内温度可以很长时间才能达到95度或根本达不到),过几秒钟后,等到管内温度达到95度,再将模块温度降到95度。这样做既达到了管内温度到95度,且速度较快。但过冲的温度量与时间及PCR管的导热系数、PCR反应液的体积都有关系。这就是各个PCR仪厂家的核心技术了。这种控温方式就称为Tube模式。
如果直接将一个温度传感器加入PCR管中,直接测量PCR管内的温度不是也可以吗?这就是Probe模式,也就是在一个不进行PCR反应的管内放入一个温度探头,仪器根据温度探头测到的温度来控制PCR管内的温度。但传感器的数据检测、分析及反馈是需要时间的,这种控制模式不一定比Tube模式好,而且如果反应体积发生变化时,就比较麻烦了。
因此,如今的PCR仪就都是Block和Tube两种模式了。如果是正常的PCR反应,一般选Tube模式。如果是长时间保温且对温度过冲要求很高,则可以考虑用Block模式。
四、abi pcr仪器是什么品牌的?
abi pcr仪器是美国ABI公司的品牌,Pcr分析仪。
美国ABI公司 ,全称 Applied Biosystems,中文翻译为“美国应用生物系统公司",是一家全球知名的跨国PCR仪生产厂商,生产了世界上第一台PCR仪,第一台定量PCR仪。
美国ABI公司于2006年7月20日进入中国,成立分公司,称为“爱普拜斯应用生物系统贸易(上海)有限公司”。
五、pcr仪器忽然响了一声?
正常,一般pcr仪都会在pcr程序结束时会报警提醒使用者。
六、pcr生物柜操作流程?
1. 试剂准备阶段
试剂准备是 PCR 操作的第一个流程,需要在试剂贮存和准备区的超净工作台或生物安全柜进行,用确保无污染的移液器、枪头及容器等进行分装。所有的 PCR 体系都应该在 -20℃ 保存,除了 ddH2O 之外,其余的试剂组份需完全融化之后再加入,以免影响浓度。配制反应体系应在快速进行,以减少非特异性扩增。体系配制完成之后应马上进行 PCR 反应。
2. 样本制备阶段
样本制备是整个 PCR 反应中最为关键的环节,在接收样本时一定要确保样本的密封性以及样本编号的唯一性。严格遵守操作规程进行加样操作,操作时候尽量少说话或者不说话。
所有操作需要在生物安全柜内进行,操作前后生物安全柜需要进行紫外灯消毒,注意生物安全柜中物品的排放。戴手套并勤于更换,要有「无核酸观念」 。
3. 核酸扩增
在核酸扩增环节需要选择质量好的 Ep 管,装入反应体系的 EP 管上机前混匀、离心,将管壁及管盖上的液体甩至管底部。在样本检测的同时设立对照(阳性对照、阴性对照、阴性模板、试剂对照)。同时严密检测 PCR 扩增仪的各项性能指标,其中对 PCR 扩增仪而言温度控制就意味着质量。
4. 产物分析
常见问题:
1)无 CT 值出现:模板量不足(杂质的引入及反复冻融的情况等)
2)CT 值出现过晚(大于 38):各种反应成分的降解或加样量的不足
3)标准曲线线性相关性不佳:加样误差、标准品出现降解等
4)阴性对照有信号:模板有基因组的污染
5)扩增效率低:反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解、反应抑制
6)扩增曲线的异常:模板的浓度太高或荧光染料的降解
七、pcr技能操作考试流程?
1. 试剂准备阶段
试剂准备是 PCR 操作的第一个流程,需要在试剂贮存和准备区的超净工作台或生物安全柜进行,用确保无污染的移液器、枪头及容器等进行分装。所有的 PCR 体系都应该在 -20℃ 保存,除了 ddH2O 之外,其余的试剂组份需完全融化之后再加入,以免影响浓度。配制反应体系应在快速进行,以减少非特异性扩增。体系配制完成之后应马上进行 PCR 反应。
2. 样本制备阶段
样本制备是整个 PCR 反应中最为关键的环节,在接收样本时一定要确保样本的密封性以及样本编号的唯一性。严格遵守操作规程进行加样操作,操作时候尽量少说话或者不说话。
所有操作需要在生物安全柜内进行,操作前后生物安全柜需要进行紫外灯消毒,注意生物安全柜中物品的排放。戴手套并勤于更换,要有「无核酸观念」 。
3. 核酸扩增
在核酸扩增环节需要选择质量好的 Ep 管,装入反应体系的 EP 管上机前混匀、离心,将管壁及管盖上的液体甩至管底部。在样本检测的同时设立对照(阳性对照、阴性对照、阴性模板、试剂对照)。同时严密检测 PCR 扩增仪的各项性能指标,其中对 PCR 扩增仪而言温度控制就意味着质量。
4. 产物分析
常见问题:
1)无 CT 值出现:模板量不足(杂质的引入及反复冻融的情况等)
2)CT 值出现过晚(大于 38):各种反应成分的降解或加样量的不足
3)标准曲线线性相关性不佳:加样误差、标准品出现降解等
4)阴性对照有信号:模板有基因组的污染
5)扩增效率低:反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解、反应抑制
6)扩增曲线的异常:模板的浓度太高或荧光染料的降解
八、pcr仪器卡住了怎么办?
你可以尝试重启仪器,如果重启失败可以联系工程师
九、pcr检测仪器能查什么?
实时荧光定量pcr仪,由荧光定量系统和计算机组成,用来监测循环过程的荧光。与实时设备相连的计算机收集荧光数据。数据通过开发的实时分析软件以图表的形式显示。原始数据被绘制成荧光强度相对于循环数的图表。原始数据收集后可以开始分析。实时设备的软件能使收集到的数据进行正常化处理来弥补背景荧光的差异。正常化后可以设定域值水平,这就是分析荧光数据的水平。
采用荧光定量PCR检测技术可以对淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人类乳头瘤病毒、单纯疱疹病毒、人类免疫缺陷病毒、肝炎病毒、流感病毒、结核分枝杆菌、EB病毒和巨细胞病毒等病原体进行定量测定。与传统的检测方法相比具有灵敏度高、取样少、快速简便等优点。
十、aqp仪器如何操作?
大致的概括一下超平仪的使用 把超平仪的三脚架分开放稳后,首先进行粗平调整也就是把仪器的水平水珠尽量居中,然后旋转螺旋杆进行微调,使仪器保持水平状态,这样目镜旋转所观察在十字刻度线焦点的位置就在同一水平位置了。 先说个简单的,超平,术语是水准测量,工地上砌墙等精度要求不高的,用激光扫平仪。精度要求高的话就要用水准仪,你只要记住,水准仪,打出的是一条水平线,然后记住标尺上的数字,数字的差就是二个点的高程差。 放线,一般采用经纬仪,原理就是打角度,一般都是90度打,因为房子是直角。至于仪器的使用,那没法说得清,每种仪器也不一样。