一、如何确定紫外分光光度计的仪器性能?
紫外可见分光光度计的主要性能指标有光度准确度、波长范围、波长准确度、波长重复性、杂散光、重复测量精确度、基线稳定性和平坦性、狭缝宽度、响应时间及扫描速度等
二、紫外光谱仪和紫外分光光度计光度计的区别?
紫外分光光度计与紫外可见分光光度计的区别:
1、测量的范围不同:
(1)紫外分光光度计量程为200nm~600nm间(包括部分可见光)。
(2)紫外可见分光光度计量程为200nm~1000nm。
2、所用灯不同:
(1)紫外光区通常用氢灯或氘灯。
(2)见光区通常用钨灯或卤钨灯。
3、原理不同:
(1)紫外分光光度计,就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。
(2)紫外-可见分光光度计是基于紫外可见分光光度法原理,利用物质分子对紫外可见光谱区的辐射吸收来进行分析的一种分析仪器。
三、紫外可见分光光度计的主要组成部件有哪些?
紫外-可见分光光度计由5个部件组成: ①辐射源。必须具有稳定的、有足够输出功率的、能提供仪器使用波段的连续光谱,如钨灯、卤钨灯(波长范围350~2500纳米),氘灯或氢灯(180~460纳米),或可调谐染料激光光源等。 ②单色器 。它由入射、出射狭缝、透镜系统和色散元件(棱镜或光栅)组成,是用以产生高纯度单色光束的装置,其功能包括将光源产生的复合光分解为单色光和分出所需的单色光束。 ③试样容器,又称吸收池。供盛放试液进行吸光度测量之用,分为石英池和玻璃池两种,前者适用于紫外到可见区,后者只适用于可见区。容器的光程一般为0.5~10厘米。 ④检测器,又称光电转换器。常用的有光电管或光电倍增管,后者较前者更灵敏,特别适用于检测较弱的辐射。近年来还使用光导摄像管或光电二极管矩阵作检测器,具有快速扫描的特点。 ⑤显示装置。这部分装置发展较快。较高级的光度计,常备有微处理机、荧光屏显示和记录仪等,可将图谱、数据和操作条件都显示出来。
四、紫外分光光度计用途?
1、用来测量待测物质对可见光(400~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器,称为可见分光光度计。可在600nm测定细菌细胞密度。
2、紫外可见光谱仪用来测量待测物质对可见光或紫外光(200~760nm)的吸光度并进行定量分析的仪器。可以测定核酸和蛋白的浓度,涡街流量计也可以测定细菌细胞密度。
3、紫外分光光度计又可分为单光束,假双光束,双光束。它们的用途又有区别。
4、单光束:适于在给定波长处测量吸光度或透光度,一般不能作全波段光谱扫描,要求光源和检测器具有很高的稳定性。
5、双光束:自动记录,快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响,特别适合于结构分析。仪器复杂,价格较高
五、光度计的基本组成?
光度计是由光源、单色器、样品室、检测器、显示系统等五部分组成。光度计又称光谱仪,是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围包括波长范围为380~780nm的可见光区和波长范围为200~380nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。
光度计:
分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光线透过测试的样品后,部分光线被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。物质对光的选择性吸收波长,以及相应的吸收系数是该物质的物理常数。当已知某纯物质在一定条件下的吸收系数后可用同样条件将该供试品配成溶液,测定其吸收度,即可由上式计算出供试品中该物质的含量。
六、紫外分光光度计的使用?
紫外可见分光光度计光度测量
在模式选择屏幕中选择<1.Photometric光度>选项,将显示参数配置屏幕;
用GOTOWL键设定测量波长;
按F2键设定进样控制;
按START/STOP键时,测量开始,显示测量屏幕;
如需做空白校正,应在测量前先设置空白样品,然后,按AUTO-ZERO键,将测量值置为OABS(100%);
2.紫外可见分光光度计校正
开机预热10分钟足矣;
放入黑块和标样(没有的自己配),关闭盖子;
把灯光对着黑块,把透光度调0;
把灯光对标样,将吸光度调到100%;
3.参比溶液介绍
参比溶液又称空白溶液。测量时用作比较的、不含被测物质但其基体尽可能与试样溶液相似的溶液。通常,用参比溶液扫描的曲线应是一条平坦的直线。有时,基体中,虽不含被测物质,但含有别的物质,这时必须保证其不影响测试。经常碰到的是试剂空白中含有被测物质,此时必须经过纯化将其除去。否则将影响测定结果。
4.紫外可见分光光度计使用注意事项
1.开机前应先预热15分钟,然后开机自检;
2.湿度要控制在75%左右,温度在5~30度之间;
3.仪器要稳压电源,接地要好。并且避免阳光直接照射;
七、紫外可见分光度计K值?
紫外可见分光光度计法测定组分、其K值即吸收系数和组分的结构有关、带有共轭效应的有机物、其K值会变大!紫外可见光吸收光谱属于分子中价电子跃迁、吸收系数都比较大、远大于红外光谱的k值!
八、labtech紫外分光度计的使用步骤?
打开电脑。
2. 打开紫外分光光度计。
3. 在电脑屏幕上双击打开软件图标。 4. 单击软件界面上“校零”按钮。 5. 打开紫外分光光度计上的盖子。
6. 将“参比液”置于紫外分光光度计的靠里面位置槽。 7. 将“标准待测液”置于紫外分光光度计的外面位置槽。 8. 将盖子拉回盖上。
9. 放好“参比液”样品和“标准待测液”样品后,点击软件上“开始测量”按钮。
10.此测量装置不能像例子色谱仪和原子分光光度那样自动计算平行样。例如需要测两次平行样,则需要两次放入紫外分光光度计中对应的平行样品。 11.测量完的数据点击“保存”。如需导出数据,则点击导出,选择以Excel形式导出数据即可。
12.关闭时先将紫外分光光度计关闭,再关电脑。
13.使用比色皿时,两手捏比色皿的两磨砂面,不能碰触比色皿的玻璃透明面,否则会影响吸光度的测量。
14.装入比色皿的液体至少得为比色皿高度的2/3.装完液体后,用擦镜纸将比色皿擦拭干净,注意:擦拭时需一个方向擦拭,不要来回乱擦拭。 15.比色皿放入紫外分光光度计中时透明玻璃面应对着光照方向。
九、紫外分光光度计的用法?
1、机器开关在机器的右侧,按一下就会打开,有个小的屏幕,可以按数字键来操作选项,测吸光值操作。
2、按数字键1,进入选项,有当前参数、吸光度等。
3、点击键盘上的GOTO键去设置,一般设置为600,输入直接按数字键就可以。输入之后按ENTER这个键,这个是确认键。
4、把样品放到比色皿里面,留一个比色皿方蒸馏水,将蒸馏水的比色皿放到第一个其余的依次放入。
5、盖上一起的盖子,拉环的位置正处于测定第一个比色皿的位置,这一步需要归零,按键盘上的ZREO键。
6、归零之后,开始依次用力拖动把手,显示屏上就会显示出对应的吸光度,依次纪录数值,就能完成测定吸光值的实验。
十、紫外分光光度计的原理?
紫外分光光度计是一种用于测量物质吸收光谱的仪器,通常用于化学、生物和药物等领域的分析和研究。其原理是基于物质分子的电子能级结构和电磁波与物质的相互作用。
当物质受到紫外光照射时,其分子内部的电子将从基态跃迁到激发态,这个跃迁能量与物质分子的结构和成分有关。紫外分光光度计通过照射物质样品并测量其吸收的光强度,来推断物质的电子能级结构和分子结构。
具体地说,紫外分光光度计的工作原理是:将一束波长可调的紫外光照射到物质样品上,通过样品的吸收来测量紫外光的透射率。在样品和探测器之间放置一个单色器(通常是光栅),可以将透射的光分离成不同波长的光,然后使用探测器测量每个波长下的透射率。
通常情况下,使用一条基准曲线(通常是乙醇或水溶液的曲线)来校准仪器。这条曲线将告诉我们不同波长下的透射率和吸光度之间的关系。然后,将需要测量的样品放入紫外分光光度计中,测量其吸光度,利用校准曲线计算出样品的吸收光谱。
通过对吸收光谱的分析和比较,可以获得样品的结构和成分等相关信息,为化学、生物、药物等领域的研究提供了有力的工具。