一、pcr扩增计算？
两个都是通过标准曲线法计算扩增效率，其实是一样的，按照定义理解，完全扩增的话1条变2条，2条变4条，扩增效率200％，但一般通过软件计算都是提供第一种方法（用的比较多），扩增效率最大为100％。本质上两者是相同的。
二、为什么要用PCR扩增？
PCR三步骤：变性、退火、延伸，变性是高温下DNA双链变成单链，退火是低温下引物跟DNA模板结合，引物不跟模板配对，是没法扩增的
三、pcr扩增体系包括什么？
PCR扩增体系主要由引物，酶，dNTP，模板，Mg2+等基本要素组成。
(一) PCR扩增原理
PCR(Polymerase ChainReaction) ， 即聚合酶链反应， 是由Kary Mullis等人首创的一项体外快速扩增DNA的方法， 它可使极微量的某一特定序列的DNA片段在数小时内特异性扩增至百万倍以上。PCR扩增DNA通常由20~40个PCR循环组成。
每个循环由高温变性、低温退火、适温延伸3个步骤组成。高温时， DNA变性，氢键打开，双链变为单链以作为扩增的模板；低温时，一对引物(即左端引物和右端引物) 分别与模板DNA的2条单链特异性互补结合， 即退火；
然后适温时， 在DNA聚合酶介导下， 将4种三磷酸脱氧核苷(dATP、dTTP、dGTP、dCTP) 按碱基互补配对原则不断添加到引物末端， 按5'→3'方向将引物延伸自动合成新的DNA链， 使DNA重新变成双链。将合成的DNA双链不断重复以上的变性、退火、延伸过程， 则左、右引物间这段DNA的量就可指数倍增加。
若重复进行这一反应n次， 从理论上讲原始的DNA数量可以被扩增为原来的2”倍， 因此DNA的量在短时间内特异性地获得了极度的放大。
四、PCR技术扩增的目的是什么？为什么要PCR技术扩增？
目的是合成大量DNA片段,属于基因工程操作程序的 目的基因的获取。
大量扩增目标基因片段,用于基因工程或检测. 如：怀疑牛肉中掺杂马肉,就可以用马基因的特异性引物对样品进行PCR,经扩增后如果能够得到响应条带,就可证实.方法简单易行,相比其它方法有优越性.
五、PCR基因扩增原理？
PCR（聚合酶链式反应）是一种体外扩增DNA的技术，其基本原理是在一定的条件下，利用DNA聚合酶酶活性，通过反复进行三步循环反应，使目标DNA序列在体外得以扩增。
PCR扩增的三个步骤如下：
反应体系的变性：将PCR反应体系中的DNA双链分离成两条单链，使其成为模板链。
引物的结合：在反应体系中加入两个特异性引物，它们分别与模板链的两端互补结合，形成引物-模板复合物。
DNA聚合酶的扩增：在反应体系中加入DNA聚合酶，它会在引物-模板复合物上开始扩增新的DNA链。DNA聚合酶从引物的3'端开始向5'端移动，沿着模板链合成新的DNA链。这个过程被称为扩增。
通过不断重复这三个步骤，PCR反应可以在短时间内扩增出大量目标DNA序列。PCR技术已经广泛应用于基因克隆、基因检测、疾病诊断、法医学等领域。
六、pcr扩增技术原理？
PCR技术的基本原理 类似于DNA的 天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR是一种体外DNA 扩增技术，是在模板DNA、引物和4种脱氧核苷酸存在的条件下，依赖于DNA聚合酶的酶促合反应，将待扩增的DNA片段与其两侧互补的寡核苷酸链引物经“高温变性——低温退火——引物
PCR扩增仪
延伸”三步反应的多次循环，使DNA片段在数量上呈指数增加，从而在短时间内获得我们所需的大量的特定基因片段。
在环境检测中，靶核酸序列往往存在于—个复杂的混合物如细胞提取液中，且含量很低，对于探测这种复杂群体中的特异微生物或某个基因，杂交就显得不敏感。使用PCR技术可将靶序列放大几个数量级，再用探针杂交探测对被扩增序列作定性或定量研究分析微生物群体结构。PCR技术常与其他技术结合起来使用， 如RT-PCR、竞争PCR、槽式PCR、RAPf)、ARDRA等。
七、pcr扩增用的引物怎么确定？
若是根据已知序列扩增未知物种的相应序列，可以根据先根据已知序列进行Blast搜索，发现其他同源序列，保存后进行比对，找出其中较保守区域，并根据Primer或Oligo等软件对某条序列进行分析，搜索其中适合做引物的片段，并人工修正不合适部分。也可以设计成兼并引物。
如果已经获得序列，只是需要设计引物将其中某段扩增出来，相对就简单些了，可以直接用上述软件进行设计就可以了。
八、pcr扩增为什么需要两个引？pcr扩增为什？
PCR就是聚合酶链式扩增反应，因为DNA是双链，扩增时就需要同时扩增两条链，需要设计上游和下游引物，同时扩增DNA双链。
九、pcr扩增的引物是什么？
一小段的DNA或者RNA，它能与母链的一段碱基序列互补配对。
十、pcr扩增对象是什么？
模板的取材主要依据PCR的扩增对象，可以是病原体标本如病毒、细菌、真菌等。也可以是病理生理标本如细胞、血液、羊水细胞等。法医学标本有血斑、精斑、毛发等。
标本处理的基本要求是除去杂质，并部分纯化标本中的核酸。多数样品需要经过SDS和蛋白酶K处理。难以破碎的细菌，可用溶菌酶加EDTA处理。所得到的粗制DNA，经酚、氯仿抽提纯化，再用乙醇沉淀后用作PCR反应模板