一、柱层析法?
柱层析原理: 柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。
当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。 硅胶柱层析流动相: 极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸 一般都是利用极性相似相容原理,看流动相与固定相的极性,大部分是固定相的极性小于流动相,然后流动相的极性与所要洗脱的物质极性比较接近,从而将物质洗脱下来。
二、柱层析纯化原理?
柱层析纯化是一种基于物质分子在不同介质中迁移速度差异的分离技术。原理是将混合物分离到固定相和流动相之间的化学亲和力和物理性质差异,通过选择适当的固定相和流动相,使具有不同亲和力和性质的成分在柱中发生不同的迁移速度,从而实现混合物的分离和纯化。柱层析纯化具有分离效率高、分离纯度高、适用范围广等优点,被广泛应用于生物制药、食品工业等领域。
三、硅胶柱层析和大孔树脂柱层析的区别?
大孔吸附树脂是一类不含交换基团且有大孔结构的高分子吸附树脂,具有良好的大孔网状结构和较大的比表面积,可以通过物理吸附从水溶液中有选择地吸附有机物即非极性或极性较弱的物质,具有物理化学稳定性高、比表面积大、吸附容量大、选择性好、吸附速度快、解吸条件温和、再生处理方便、使用周期长、宜于构成闭路循环、节省费用等诸多优点.树脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附质) 之间的范德华引力,通过它巨大的比表面进行物理吸附而工作,使有机化合物根据有吸附力及其分子量大小可以经一定溶剂洗脱分开而达到分离、纯化、除杂、浓缩等不同目的.
硅胶柱的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离,一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程.其中有微孔,对不同化合物的吸附能力不同,然后选用适当的洗脱剂进行洗脱从而达到分离.
四、qsepharose柱层析法原理?
柱层析原理:
柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。
当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。
硅胶柱层析流动相:
极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
一般都是利用极性相似相容原理,看流动相与固定相的极性,大部分是固定相的极性小于流动相,然后流动相的极性与所要洗脱的物质极性比较接近,从而将物质洗脱下来。
五、分配柱层析原理?
层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。柱层析技术(chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来
六、mci柱层析是什么?
MCI系列精细分离填料是在三菱化学Diain和Sepabeads大孔吸附树脂基础上设计的,因为基于现代的HPLC高压液相色谱分离技术,较小的颗粒有更高的色谱分离性能,广泛地用于分离天然产物和发酵产物的分离。
七、柱层析法的原理?
柱层析原理:
柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。
硅胶柱层析流动相:
极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸
一般都是利用极性相似相容原理,看流动相与固定相的极性,大部分是固定相的极性小于流动相,然后流动相的极性与所要洗脱的物质极性比较接近,从而将物质洗脱下来。
八、凝胶柱层析洗脱顺序?
凝胶色谱中组分与凝胶之间无作用力,仅仅根据分子量大小来分离。凝胶是有一定孔径散布范围的多孔物质,组分进入色谱柱后,向凝胶的孔中分散,保存程度取决于孔和组分分子的大小。
小分子悉数渗入小孔中,在流经色谱柱时阅历的旅程zui长。大分子彻底被排挤在孔外,阅历的旅程zui短。中等大小分子渗入部分较大的孔,而被较小的孔排挤,阅历的旅程居中。故洗脱次序是组分分子大小(分子量)的函数。
九、mci柱层析原理?
柱层析原理:
柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。
十、柱层析干法上样步骤?
装柱方法分为湿法和干法,一般来说,湿法装柱的效果优于干法装柱。
湿法装柱: 先将柱层析的填料活化处理后浸润在适宜的有机溶剂中,使之处于有机环境。
装柱时在层析柱自下而上依次填入硅烷花玻璃棉→石英砂→已处理好的层析填料,一边装柱一边用洗耳球轻轻敲打,使填料紧实,然后打开旋塞放掉多余的有机溶剂即可进行样品分析。
干法装柱: 现在层析柱内填入硅烷花玻璃棉,然后用不同极性的有机溶剂对层析柱的内壁进行充分润洗,待层析柱晾干,依次填入石英砂及各种层析填料,同样,一边装柱一边用洗耳球轻轻敲打,使填料紧实,然后加入一定量的有机溶剂淋洗填好的柱子,一般这个体积为柱子死体积的2倍。然后打开旋塞使淋洗液流出,即可进行样品分析。
填料紧实是保证层析柱柱效的关键,一定要注意。 层析柱最下层的棉花,我们一般是用硅烷花玻璃棉的,在马弗炉中活化即可用。
如果用脱脂棉,需要用二氯甲烷抽提3遍以去除杂质,以防干扰实验。