一、western blot实验都需要哪些仪器？
western blot实验都需要的基础仪器有： 电泳仪，制胶板，电泳槽，湿转的转膜槽或者半干转仪，脱色摇床，暗室，X光片，红外灯，成像仪，一些基础耗材和试剂等 基本上生化实验室要做western blot还是很容易的
二、什么是Western Blot？
关于这个问题，Western Blot（蛋白质免疫印迹）是一种常用的实验技术，用于检测和分析蛋白质样品中特定蛋白质的存在和数量。
Western Blot的过程通常包括以下几个步骤：
1. 蛋白质提取：从细胞或组织中提取蛋白质样品。
2. 蛋白质分离：将蛋白质样品经过电泳分离，根据蛋白质的大小将其分成不同的带状条带。
3. 转膜：将分离后的蛋白质移至膜上，通常使用聚丙烯酰胺凝胶（PVDF）或硝酸纤维素膜。
4. 封闭：将膜放入封闭液中，阻止非特异性结合。
5. 抗体探针：将特异性的抗体添加到膜上，与目标蛋白质特异性结合。
6. 洗涤：将膜洗涤以去除非特异性结合的抗体。
7. 二次抗体：加入特异性的二次抗体，该抗体与一级抗体结合。
8. 可视化：通过添加显色剂或荧光染料，观察蛋白质的特异性信号。
通过Western Blot技术，可以确定蛋白质在样品中的存在与否，以及其相对丰度。这种技术在生物医学研究中广泛应用，例如研究蛋白质表达和变化、蛋白质间相互作用等。
三、western blot电泳原理？
（本实验以转移到PVDF膜，辣根过氧化物酶HRP-ECL发光法为例）在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）中，不连续系统的凝胶包括浓缩胶（spacergel）和分离胶(separation gel)，蛋白质在浓缩胶中运动到两层凝胶的交界处时，由于凝胶孔径的不连续性使样品迁移受阻而压缩成很窄的区带，即不连续系统的浓缩效应。
在凝胶中，分子量小的蛋白质泳动速度快，分子量大的蛋白质泳动速度慢，即聚丙烯酰胺凝胶的分子筛效应。阴离子去污剂SDS使蛋白质变性，消除不同蛋白分子间的电荷差异和结构差异，使得蛋白质在电场中的泳动速度仅与蛋白质颗粒大小有关。各种蛋白质在不连续SDS-PAGE的浓缩效应和分子筛效应的作用下，按照分子量大小以一定顺序排列形成一个个区带。
四、western-blot是什么？
Western Blot中文一般称为蛋白质印迹。它是分子生物学、生物化学和免疫遗传学中常用的一种实验方法。其基本原理是通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色。通过分析着色的位置和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息。Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶或同位素标记的第二抗体起反应，经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。Western Blot显色的方法主要有以下几种： i. 放射自显影 ii. 底物化学发光ECL iii. 底物荧光ECF iv. 底物DAB呈色值得一提的是，western blot 这个名称的由来很有意思。最开始做印迹工作的是一个叫做Southern的科学家，但印迹的对象是DNA链，他把这种技术称为Southern blot，后来类似的出现了两个过程相似，但是对象不同的印迹方法，一个针对RNA，一个对蛋白质，人们分别把这两种技术的称为Northern和Western，与这两个技术的发明人没有关系了。
五、关于WESTERN BLOT的内参？
肯定要加二抗啊，内参和你的目的蛋白是一样的，也是一个蛋白，只不过表达比你的目的蛋白在各个组织之间恒定许多，它是你的目的蛋白的一个参照，但是它的作用和mark还不一样，所以内参是一定要要的，否则，人家会质疑你实验的可信性。
如果你的实验动物是大鼠，打个比方一抗是兔抗鼠吧或者其他的什么抗鼠的，二抗就是什么抗兔的，比如说羊抗兔之类，一抗最好买国外的，二抗国内的就可以了六、western blot是什么实验？
western blot是一种非常经典的定性、定量检测蛋白表达的方法。其原理通俗来说：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳,蛋白质是被检测物,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。
经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。
以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
七、western blot步骤是什么？
Western blot是一种生物学技术，用于检测特定蛋白质在样品中的存在。它可以用来识别蛋白质和定量它们的水平。步骤包括
1）蛋白质电泳：将样品经电泳分离蛋白质
2）转印：将蛋白质从电泳凝胶转移到膜上
3）抗原检测：使用特异性抗体将抗原蛋白质检测出来
4）检测：使用可见光检测特异性抗原蛋白质的存在。
八、western blot湿转原理？
western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用 在western blot转膜时，PVDF膜在甲醇活化后是带电的，因而在转膜时会将蛋白吸附。封闭的目的就是要将PVDF膜上无蛋白的部分空隙用奶粉填满，以免孵抗体的时候一抗二抗与之结合，产生非特异条带或者是背景杂乱。 所以western blot中封闭主要是起去除非特异性吸附的作用
九、western blot数据怎样分析？
western blot因为是一种定性的实验，所以它的单次结果一般不是以数据形式出现的
而即使是灰度值分析也并不需要过于精确的数字
如果有数据产生，一般是批量多次western blot结果的一个统计数据
一般采取方差分析或者t检验分析就可以了
十、northern blot显色原理？
与Southern Blot实验相似，Northern Blot也采用琼脂糖凝胶电泳，根据分子量大小不同将不同的RNA分离开来，将其原位转移至固相支持物（如尼龙膜、**纤维膜等）上，再用标记过的DNA或RNA探针，依据碱基互补配对的原则进行杂交，后进行显影或显色，以目标RNA所在位置，而其显影强度则可指示目标RNA在所测样品中的相对含量。Northern Blot不需要对RNA进行酶切，可直接在变性电泳中进行。