一、PCR所需要试剂和仪器有那些?
如果你想做荧光定量PCR的根据实验思路来说应该需要一下试剂和仪器
1.模板提取(一般为RNA):Trizol、氯仿、异丙醇、无水乙醇、DEPC处理水
2.模板浓度测定:分光光度计或NanoDrop
3.逆转录:逆转录试剂盒(或者一步法试剂盒),这一步可以用普通PCR做,也可以用水域做。
4.荧光定量PCR试剂:通常有用SYBR Green Mix做的,但是这里建议你用EvaGreen做,灵敏度和平行性都要好于SYBR Green,并且如果你那是ABI或者Stratagene的PCR如果用SYBR Green还需要加一步Rox很麻烦。
5.其他:除了以上的那些还需要离心管、PCR管或板(Axygen反应比较好)、移液枪等,暂时就想到这么多。
二、pcr仪器 全名?
pcr仪是光度计,
分光光度计,又称光谱仪(spectrometer),是将成分复杂的光,分解为光谱线的科学仪器。测量范围一般包括波长范围为380~780 nm的可见光区和波长范围为200~380 nm的紫外光区。不同的光源都有其特有的发射光谱,因此可采用不同的发光体作为仪器的光源。
三、pcr扩增所需的原料?
PCR扩增是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。
pcr扩增需要的原料有:物(PCR引物为DNA片段,细胞内DNA复制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液。
四、pcr用到哪些东西?
【PCR实验室设备清单】
一 试剂准备室
1 天平 欧莱博 MF1035C 万分位,精确度0.1mg
2 超净工作台 博科 BBS-DDC 垂直流单人单面
3 移液器 迈德飞 20-200ul 单道移液器可调
4 纯水机 欧莱博 OSJ-Ⅱ-30L 超纯水30L/h
5 低温冰箱 博科 BDF-25V270 ,-25℃立式270L
6 混匀仪 其林贝尔 BE-3100 2维混匀操控 适于多种混匀和漩涡振荡操作
7 药品冷藏箱 博科 BYC-310 2-8℃,310L单开门,
8 紫外消毒车 飞扬 ZXC 双管碳钢
二 样品制备室
1 生物安全柜 博科 BSC-1100ⅡB2-X 单人二级B2,(高全外排型,标配外挂风机+管道)
2 恒温水浴锅 欧莱博 HH-S4 双列四孔
3 低温冰箱 博科 BDF-25V270 ,-25℃立式270L
4 药品冷藏箱 博科 BYC-310 2-8℃,310L单开门,
5 离心机 博科 TG-16W 转速16600r/min,大容量6*100ml,
6 制冰机 博科 IMS-20 产冰量20kg,储冰量10kg
7 紫外消毒车 飞扬 ZXC 双管碳钢
8 低温摇床 欧莱博 OLB-110*30 恒温摇床制冷
9 移液器 迈德飞 20-200ul 单道移液器
三 扩增室
1 普通PCR基因扩增仪 朗基 朗基A300 普通pcr
2 荧光定量PCR仪 雅睿 雅睿 MA6000 荧光定量
3 核酸提取仪 爱森生物 BK-HS32 32通道磁棒磁性均一
4 移液器 赛多利斯 30-300ul 8道移液器,半支消毒型
5 药品冷藏箱 博科 BYC-310 2-8℃,310L单开门,
6 紫外消毒车 飞扬 ZXC 双管碳钢
7 超净工作台 博科 BBS-DDC 垂直流单人单面
四 产物分析室
1 电泳仪电源 六一 DYY-6C 双稳定时
2 琼脂糖水平电泳槽 六一 DYCP-31DN 适用于鉴定、分离、制备DNA,以及测定其分子量,
3 凝胶电泳分析系统 六一 WD-9413B 凝胶成像分析系统,130万像素,信噪比≥62db,
4 电热板 欧莱博 DB-Ⅱ 不锈钢电热板,远红外碳化硅加热技术,
5 超净工作台 博科 BBS-DDC 垂直流单人单面
6 紫外消毒车 飞扬 ZXC 双管碳钢
7 天平 欧莱博 MF1035C 万分位,精确度0.1mg,
8 杂交仪 汗诺 LF-Ⅲ 5-20r/min配酶标版震荡,振幅可调,数显连续可调,
五、pcr仪器各个温度的含义?
PCR仪的三种控温模式
在进行PCR仪中控温模式设定时,一般有三个选项:Block、Tube及Probe。下面就这三种模式种简单的介绍:
PCR仪的温度传感器一般是在模块下面的,也就是说仪器实际能够控制的是模块的温度,Block模式指的就是仪器以控制Block的温度为目的,也就是说你输入95度5分钟,则模块的温度达到95度后开始计时,5分钟后完成。这是zui基本的控温模式。
但是,实际上我们输入95度5分钟是希望PCR管内的温度达到95后开始计时5分钟。PCR仪器开发人员可以先将模块温度控制到97度(比如而已,如果不超过95度,管内温度可以很长时间才能达到95度或根本达不到),过几秒钟后,等到管内温度达到95度,再将模块温度降到95度。这样做既达到了管内温度到95度,且速度较快。但过冲的温度量与时间及PCR管的导热系数、PCR反应液的体积都有关系。这就是各个PCR仪厂家的核心技术了。这种控温方式就称为Tube模式。
如果直接将一个温度传感器加入PCR管中,直接测量PCR管内的温度不是也可以吗?这就是Probe模式,也就是在一个不进行PCR反应的管内放入一个温度探头,仪器根据温度探头测到的温度来控制PCR管内的温度。但传感器的数据检测、分析及反馈是需要时间的,这种控制模式不一定比Tube模式好,而且如果反应体积发生变化时,就比较麻烦了。
因此,如今的PCR仪就都是Block和Tube两种模式了。如果是正常的PCR反应,一般选Tube模式。如果是长时间保温且对温度过冲要求很高,则可以考虑用Block模式。
六、干燥氨气所需仪器?
由于氨气是碱性气体,并且易溶于水,所以不能用酸性的也不能用水溶液,那就有碱石灰,器材可以用球形干燥管,或U形的
七、钠加热用到的仪器?
用于直接加热的仪器有:试管、蒸发皿、坩埚和燃烧匙,以及玻璃棒和玻璃片等;不能直接加热的有:烧杯、烧瓶、蒸馏瓶、锥形瓶等
八、pcr用到的酶有什么特点?
当反应体系的温度回升至72℃时,DNA聚合酶要以目的基因为模板将四种脱氧核糖核苷酸逐个按照碱基互补配对原则连接在引物之后。
由此可知,该DNA聚合酶应该耐高温,而且72℃最好是它的最适温度,可以采用Taq酶,此酶是从水生栖热菌 Thermus Aquaticus ( Taq )中分离出的具有热稳定性的DNA聚合酶。
一般常用的Taq酶可以分为rTaq酶和LTaq酶两类,LTaq酶的保真性更强,耐热性也比rTaq酶好。
九、abi pcr仪器是什么品牌的?
abi pcr仪器是美国ABI公司的品牌,Pcr分析仪。
美国ABI公司 ,全称 Applied Biosystems,中文翻译为“美国应用生物系统公司",是一家全球知名的跨国PCR仪生产厂商,生产了世界上第一台PCR仪,第一台定量PCR仪。
美国ABI公司于2006年7月20日进入中国,成立分公司,称为“爱普拜斯应用生物系统贸易(上海)有限公司”。
十、配制溶液所需要的仪器?
配制溶液所需仪器:天平,称量瓶,烧杯,玻璃棒,量筒,容量瓶,试剂瓶
具体步骤如下1.用天平秤取所需重量的药品
2.将药品放入烧杯中,用量筒量取200毫升蒸馏水溶解
3.将溶解后的试剂转移至1000毫升的容量瓶中,定容至1000毫升。
.4.将试剂转移到试剂瓶中。